一、选择题（每小题2分，共60分）

1.在果醋制作过程中，下列哪项操作会引起发酵液受污染

A．榨汁机用沸水进行清洗并晾干

B．发酵瓶用温水清洗，再用75%的酒精擦拭并晾干

C．葡萄先去除枝梗，再冲洗多次

D．每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开

2.下列各曲线图表示在果酒的制作过程中，各种因素对酵母菌产生酒精速率(v)的影响，其中正确的是

3. 小李尝试制作果酒，将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验(如图)，恰当的做法是

①加入适量的酵母菌；②一直打开阀b通气；③一直关紧阀a，

偶尔打开阀b几秒钟；④把发酵装置放到4℃冰箱中进行实验

A．①③ B．②④ C．①④ D．②③

4. 果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是

A．葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵

B．在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2

C．果酒发酵过程中温度控制在30 ?C，果醋发酵过程中温度控制在20 ?C

D．在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢

5. 下列有关生物技术的叙述，不正确的是

A．制作果醋时，必须向发酵装置不断地补充无菌空气，以保证醋酸菌的生长

B．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长

C．变酸的酒表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的

D．用传统的发酵技术制葡萄酒必须添加酵母菌菌种

6． 某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是

A．用盐腌制时，加盐太少 B．用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒

C．制作卤汤时，加的料酒过多 D．装瓶后，没有将瓶口密封

7．在腐乳制作过程中，经检测发现一个毛霉细胞中的RNA比一个青霉细胞中的RNA多，最有可能是

A．DNA的含量毛霉比青霉多 B．DNA的含量青霉比毛霉多

C．合成的蛋白质毛霉比青霉多 D．合成的蛋白质青霉比毛霉多

8．在泡菜的制作过程中，不正确的是(　　)

A．按照清水与盐的质量比为4:1的比例配制盐水

B．按照清水与盐的质量比为5:1的比例配制盐水

C．盐水入坛前要煮沸冷却，以防污染

D．在坛盖边沿的水槽中要注满水，以保证坛内的无氧环境

9. 某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不当泡菜腐烂。造成泡菜腐烂的原因是(　　)

①罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖

②罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖

③罐口封闭不严，氧气抑制了其他腐生菌的生长和繁殖

④罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖

A.①③ B．②④ C．②③ D．①④

10．下列关于泡菜中亚硝酸盐含量测定的操作顺序正确的是

①配制溶液　 ②制备样品处理液　 ③制备标准显色液 ④比色

A．①②③④ B．②③④① C．①③②④ D．③①②④

11. 已知下列单细胞生物，它们具有细胞壁，但没有核膜和核仁，在研究它们生活所需条件的实验中，得出下面

A．硝化细菌、乳酸菌、颤藻 B．自身固氮菌 、乳酸菌、硝化细菌

C．固氮蓝藻、硝化细菌、乳酸菌 D．固氮蓝藻、乳酸菌、硝化细菌

12下列操作需要在火焰旁进行的一组是

①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液　④涂布平板 ⑤微生物的培养

A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④

13．纤维素酶的测定方法一般是

A．对纤维素进行定量测定

B．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定

C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定

D．对纤维素分解菌进行定量测定

14．下列常用的无菌操作中，错误的是

A．无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌

B．用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒

C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行

D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭

15．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是

A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释

B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作

C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养

D．都会在培养基表面形成单个的菌落

16．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345，下列操作方法正确的

A．操作前不用做任何处理

B．划线操作须在火焰上进行

C．在5区域中才可以得到所需菌落

D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

17．下列有关微生物培养的说法，正确的是

A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板

B．分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源

C．配制培养不同微生物的培养基时都要将PH调制中性或微碱性

D．在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌

18． 1克土样被稀释倍数为106，平板上生长的平均菌落数为80，涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 mL，则每千克样品中的活菌数约为

A．8×108 B．8×109 C．8×1010 D．8×1011

19．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B．碳源物质也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

20．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是

A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置

21．下列有关平板划线操作正确的是

A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B．打开含菌种的试管需通过火焰上方灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞

C．把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可

D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养

22．下列有关稀释涂布平板法，叙述错误的是

A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释

B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

C．适宜条件下培养

D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落

23．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4 ℃保藏的方法

24．下列关于微生物培养的叙述，不正确的是

A．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵

B．高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢

C．划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落

D．稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目

25．判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是

A．未接种的选择培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的选择培养基

26．某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是

A．利用平板划线法对细菌进行计数

B．以石油为唯一碳源的培养基筛选

C．采用稀释涂布平板法分离菌种

D．称取和稀释土壤时应在火焰旁

27. 组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的，自身不能合成组氨酸。将其接种在缺乏组氨酸的平板培养基上进行培养，有极少量菌落形成。2－氨基芴是一种致突变剂，将沾有2－氨基芴的滤纸片放到上述平板培养基中，再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养，会有较多菌落出现。以下叙述不正确的是

A．在接种前，2－氨基芴和滤纸片须进行灭菌处理

B．若用划线法接种可以根据菌落数计算活菌数量

C．基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关

D．此方法可以用于检测环境中的化学致突变剂

28. 研究人员把噬菌体和细菌按1︰10混合，然后除去游离的噬菌体，在培养过程中定期取样，稀释涂布在连片生长的细菌平面（菌苔）上，检测实验结果表明，混合后24min内取样涂布，菌苔上产生空斑的数目不变；混合34min后取样，菌苔上空斑数目迅速增加；再过10min取样，菌苔上空斑数稳定。下面的分析和推理不正确的是

A．24min内取样，新复制的噬菌体还未从细菌体内释放出来

B．34min时取样，根据空斑数量可推测样液中噬菌体的数量

C．取样液中的噬菌体涂布到菌苔上以后噬菌体不再增殖

D．实验证明病毒是一种生物，其具备在细胞内增殖的特性

29. 要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用

A．加入青霉素的培养基 B. 固体培养基

C. 液体培养基 D.加入高浓度食盐的培养基

30. 在腐乳的制作过程中，毛霉等微生物能够将豆腐成分中的蛋白质分解为氨基酸，有一个由两条多肽链组成的蛋白质，其相对分子质量为10338，每个氨基酸的平均相对分子质量为120，则这个蛋白质是由多少个氨基酸形成的

A．102个 B.101个 C.100个 D.99个

非选择题（共40分）

31．葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题。

(1)利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是________。

(2)该微生物通过无氧呼吸可分解葡萄糖，产生的终产物是酒

精和________。

(3)甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如上图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是_____________________________________，导致发酵中出现的主要异常现象是__________________________。丙同学的错误是____________________________，导致发酵中出现的主要异常现象是______________________________。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是________、________、________。

(4)在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该错误操作是________________________________________________________。

32．回答下列有关传统发酵技术的习题：

(1) 果酒的制作离不开酵母菌，在自然发酵的过程中菌种的来源是_________，酒精发酵时的温度一般控制在_________。

(2) 泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行_________的过程。该过程发生在乳酸菌的_________中。

(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_______________、_____________和_____________等。

(4)制作腐乳主要利用的微生物是___________， 这种微生物产生的酶主要有_______________；在腐乳制作过程中加盐的目的是_______________。（至少写两个）

33.某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1) 采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2) 接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。

在接种之前应对培养基进行__________灭菌，灭菌温度为__________。

(3) 筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够____________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

34.请回答微生物培养的有关问题。

(1) 在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑__________、____________和

____________等条件。

(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行____________；操

作者的双手需要进行清洗和____________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是

紫外线能使蛋白质变性，还能_______________________________。

(3) 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的__________________。

(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的____________________________等菌落特征对细

菌进行初步的鉴定(或分类)。

(5) 培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方

法是______________________________________________________________。

(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，

以防止培养物的扩散。

生物答案

32答案：(1)葡萄皮上的野生型酵母菌 18-25度　(2)无氧呼吸　细胞质　(3)温度、食盐用量、腌制时间　(4)毛霉 蛋白酶和脂肪酶 抑制其他微生物的生长 调味或使腐乳成形。

33答案(1)液体

(2)系列稀释(或“梯度稀释”)　淀粉　倒置　未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”) 高压蒸汽 121

(3)出现透明圈　分泌淀粉酶使淀粉发生水解　平板划线

34．答案(1) 温度 酸碱度　渗透压

(2)灭菌　消毒　损伤DNA的结构

(3)比例合适　(4)形状、大小、颜色

(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生

(6)灭菌