Sy-6 叶绿体中色素的提取和分离

Ⅰ 实验程序

一、实验原理

叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以通过研磨法用丙酮提取叶绿体中的色素(若无丙酮亦可用酒精代替)。

层析液（在60℃～90℃下分馏出来20份石油醚 + 2份丙酮 + 1份苯）是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。)，所以，可以用纸层析法分离出叶绿体中的色素。



二、目的要求

1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。

2.探索叶绿体中有几种色素。

胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b随层析液在滤纸上扩散速度不同，可以分出四条色素带。



三、重点与难点

重点:

1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。

2.探索叶绿体中有几种色素。

难点:

1.该实验中应注意的问题。

2.培养学生独立实验的能力,掌握探究实验的方法。



四、材料用具

新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。

干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒(10mL)，天平。

丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。



五、方法步骤(观察录象)

1.研磨 2.滤液 3.把滤液印在滤纸上(与教材不同) 4.层析

☆用毛细吸管划线时间长易损伤纸纤维,效果欠佳,改用玻璃片印迹,效果好。



结论:叶绿体含有四种色素,胡萝卜素在最上端,呈橙黄色；其次是叶黄素，呈黄色；中间是蓝绿色的叶绿素a ；下端是黄绿色的叶绿素b。

注意:本实验丙酮加入3mL足够，研磨液用杵棒推挤，即可挤出较浓的色素提取液，连同糊状物直接倒入小烧杯，不需过滤，但挤出的研磨液仍可称为“过滤液”。





Ⅱ 随堂演练

1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上到下依次为( )

A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b

B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素

C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素

D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素

2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是( )

A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素

C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类

3.用纸层析法