1.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是

A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列

B.用PCR方法扩增目的基因时必须知道基因的全部序列

C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶

D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞

2.软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH 的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是

A. 首先经超排卵处理后进行体外受精 B. 从囊胚中分离细胞，培养后检测基因型

C. 将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫 D. 根据检测结果筛选基因型为hh 的胚胎

3.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是

A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同

B.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养使细胞增殖

C.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶

D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒

某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是

A．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞

B．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害

C．出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控

D．生根时，培养基通常应含α—萘乙酸等生长素类调节剂

下列关于质粒运载体的说法不正确的是

A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解

B．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达

C．没有限制酶就无法使用质粒运载体

D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则

6．实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是?

A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒?

B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化

C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型?

D．丁过程得到的细胞的遗传性状可能由遗传物质发生改变引起

7 .某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是

A. 利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗

B. 采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上

C. 采用花粉粒组织培养获得单倍体苗

D. 采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养

8．在工业化大量培养植物试管苗的过程中，一般进行如下操作，则正确的操作顺序是

①诱导形成芽 ②取合适外植体 ③诱导形成愈伤组织

④诱导形成未分化状态的细胞 ⑤诱导形成根

A．②①③④⑤ B．②④③①⑤ C．②③④①⑤ D．②⑤①④③

9..哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图（N 表示染色体组）

据图分析，下列叙述错误的是

A.次级卵母细胞形成的过程需要激素调节

B.II、III 和IV 细胞分裂后期染色体数目相同

C.细胞III 只有在精子的作用下才能形成成熟卵子

D.培育转基因动物应选择细胞IV 作为受体细胞

10.关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确的是

A.噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统

B.提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异

C.PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应的模板

D.成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透过性

11.生物实验中常用盐酸处理实验材料，下列说法正确的是

A．盐酸浓度过高会破坏过氧化氢酶的空间结构导致其失活

B．盐酸处理染色质能促进DNA与派洛宁（吡罗红）结合

C．盐酸解离根尖的同时也为龙胆紫染色创造酸性环境

D．盐酸处理细胞有利于健那绿（詹纳斯绿）对线粒体染色

12.下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是

A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞

B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成

C．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群

D．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性

13.下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是

A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目

B.放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置

C.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接

D.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

14.下列实践活动包含基因工程技术的是

A.水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种

B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦

C.用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆

D.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株

15.在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，下列生命活动不会同时发生的是：

A．细胞的增殖和分化 B．光能的吸收与转化

C．基因的突变与重组 D．ATP的合成与分解

从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是

A．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 B．构建含目的肽DNA片段的表达载体

C．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽 D．合成编码目的肽的DNA片段

17.天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是

A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B

B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B

C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

18.通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是

A．对供体和受体母牛都要进行相同激素处理

B．受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行

C．胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低

D．对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植

19.华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有:①转基因 ②核移植 ③体外受精 ④体细胞克隆 ⑤胚胎移植

A. ①③ B. ①④ C. ③⑤ D.②⑤

20.关于现代生物技术应用的叙述，错误的是

A．蛋白质工程可以合成自然界不存在的蛋白质

B．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养

C．植物组织培养技术可以用于植物茎尖脱毒

D．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体

21.下列叙述正确的是

A．胚胎发育过程中不存在细胞衰老或凋亡现象

B．用小鼠不同器官和组织构建的cDNA文库相同

C．垂体功能受损的幼犬会出现抗寒能力减弱等现象

D．刺激支配肌肉的神经，引起该肌肉收缩的过程属于反射

22.下列关于胚胎工程的叙述，错误的是

A．体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精

B．受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植

C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需要加入血清

D．试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术

动物细胞融合的目的中，最重要的是

A．克服远缘杂交不亲和的障碍 B．培育新物种

C．制备单克隆抗体 D．生产杂交细胞

24.下列不是细胞融合常用方法的是

A．加热　　　　　 B．灭活的病毒诱导

C．电刺激 D．聚乙二醇作为诱导剂

25.用a表示骨髓瘤细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为

A．a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养

B．a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养

C．a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养

D．a、aa、ab、bb、b→ab→能无限增殖的ab培养

26.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，下列有关此项技术的说法中不正确的是

A．动物细胞融合和动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础

B．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞直接放入培养液中就能融合为杂交瘤细胞

C．实验中杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖的方式是主动运输

D．按照培养基的用途分类，实验中筛选杂交瘤细胞的培养基是选择培养基

27.下列能正确表示高等动物胚胎发育顺序的是

受精卵→卵裂→原肠胚→囊胚→组织器官的分化

B、卵→卵裂→原肠胚→组织器官分化

C、受精卵→囊胚→原肠胚→幼体

D、受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→组织器官的分化

美国和日本的两个研究小组分别宣布，其研究人员成功地将人体皮肤细胞改造成了几乎可以和胚胎干细胞相媲美的多功能干细胞——“iPS细胞”，人类"iPS细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有关“iPS细胞”的说法正确的是

“iPS细胞”分化为人体多种组织细胞的过程体现了细胞的全能性

B．“iPS细胞”既可分化形成神经元，也可用于制造心肌细胞，说明“iPS细胞”在分裂时很容易发生突变

C．“iPS细胞”有细胞周期，它分化形成的神经细胞没有细胞周期

D．“iPS细胞”只能分化成人体多种组织细胞，是因为它具有人体部分细胞的遗传物质

中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵细胞中，克隆出世界上第一批大熊猫胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关克隆大熊猫胚胎的叙述中，错误的是

在形成早期胚胎的过程中，依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等几个阶段

B．兔子卵细胞质的作用只是激发大熊猫细胞核的全能性

C．克隆出的早期胚胎中，各细胞核具有相同的遗传信息

D．在形成早期胚胎的过程中，细胞进行有丝分裂

30.人血清白蛋白(HSA)在临床上的需求量很大，通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HlV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，相关叙述不正确的是

A.图中①一般经胰蛋白酶处理可以得到③

B．一般情况下，用雌激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞

C．在②进入③之前要用限制酶、DNA连接酶和运载体等工具来构建基因表达载体

D．⑥是⑤生出的后代，但⑥的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似

二、非选择题（55分）

31.（13分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是 酶和 酶。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，其作用是 。原生质体经过 再生，进而 形成愈伤组织。

（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有 。

（6）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

32.（15分）基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答：

?（1）图中A是? ??????；在基因工程中，需要在?????? 酶的作用下才能完成剪接过程。

（2）在下图基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤有?????? 。（用图中序号表示）

（3）从分子水平分析不同种生物之间的基因移植成功的主要原因是?????? ，这也说明了不同生物共用一套???? 。

（4）Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2 mRNA的分子数，从而反映出Bcl-2基因的转录水平。①图中X表示 过程。

②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成 用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是 。在获得单链模板的方式上，PCR扩增与体内DNA复制不同，前者通过_____解开双链，后者通过________解开双链。

（5）将基因表达载体导入受体的受精卵中常用 法，在培育转基因植物常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是 。

（6）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源是?????????。

33.（13分）科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：

（1）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫的小鼠脾脏细胞中获取????? ，在诱导剂的作用下与???融合，形成杂交瘤细胞，并通过 或 方法生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，具有????的特点。

（2）生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞，主要原因是????????? 。

（3）在细胞培养的过程中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的??，此外还要定期用?? 处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。

（4）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于?????（生物工程）的范畴。图示该过程中，根据预期的??? ，设计????，最终必须对??????? 进行操作。

（5）经过改造的鼠—人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是??? 。

34.（14分）下图为哺乳动物胚胎分割和性别鉴定示意图。请据图回答：

?

胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的???。对胚胎进行分割时，要特别注意将??均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看作动物? ?繁殖方法之一。

（2）①过程分割出的少量胚体细胞用来做性别鉴定，该技术常采用的方法是??? ?。

（3）通常胚胎干细胞可以从???、??? （写出两种方法）中分离得到。

（4）从供体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 ，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为 。

（5）细胞胚胎可用人工方法从供体输卵管内获得，该过程称为 ；也可从供体体内取出卵子，通过 后进行早期胚胎培养获得。

（6）囊胚通过 技术移入受体子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。

（7）胚胎干细胞（ES）可由囊胚的 分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向 后用于疾病的细胞治疗。

答案

选择题(每小题1.5分，共45分)

题号

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15



答案

D

C

C

A

B

C

C

B

B

D

A

C

B

D

C



题号

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30



答案

A

A

C

C

D

C

B

C

A

C

B

D

C

B

B



非选择题（55分）

31.（13分）

（1）纤维素酶和果胶酶

（2）叶绿体

（3）保持原生质体完整性，细胞壁，脱分化

（4）双亲（或花椰菜和黑芥）， 解离 ，漂洗

（5）1、2、4

（6）黑腐病菌

33.（13分）

（1）B淋巴细胞，骨髓瘤细胞，体内培养或体外培养，特异强、灵敏度高???

浆细胞不能无限增殖??

抗生素，?? 胰蛋白酶??

蛋白质，嵌合抗体功能，嵌合抗体的结构， 基因???

（5）对人体的不良反应（或过敏反应等副作用）减少

34.（14分）

（1）桑椹胚或囊胚，内细胞团， 无性繁殖（或克隆）???

（2）用基因探针进行DNA杂交???

（3）早期胚胎、原始性腺????

（4）原代培养 接触抑制 ?

（5）冲卵 体外受精

（6）胚胎移植 冷冻（或：低温）

（7）内细胞团细胞 诱导分化