安徽省广德中学2013-2014年学度高二第二学期期中考试生物试题

选择题(共48分，每题1.5分）

1.下列实践活动包含基因工程技术的是（ ）

A.水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种

B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦

C.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株

D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆

2.如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7 kb,1kb＝1000对碱基)上相应的E－F区域(0.2 kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2会(　　 )

A．既能被E也能被F切开 B．能被E但不能被F切开

C．既不能被E也不能被F切开 D．能被F但不能被E切开

3．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。下图表示四种质粒和目的基因，其中箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因运载体的质粒是 (　 　)

4.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是（ ）

A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列

B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶

D.根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞不利于基因的表达

下图是基因工程中利用pBR322质粒(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)与抗病基因构建重组质粒的示意图，该质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、

ApaⅠ等四种限制性核酸内切酶的识别序列及切割位点见下表。结合图表分析，下列叙述错误的是( )

A．pBR322质粒、抗病基因和重组质粒的基本组成单位都是脱氧核苷酸

B．形成重组质粒时，应选用限制性核酸内切酶PstⅠ和EcoRⅠ对含抗病基因的DNA、质粒进行切割

C．一个质粒被限制性核酸内切酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段和6个黏性末端

D．将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的受体细胞

6.某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是( )

A.导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒

B.RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶

C.可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D.在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

7．下列有关植物体细胞杂交技术的叙述，错误的是(　 　)

A．需要在无菌环境条件下且培养基中需要加入植物激素

B．需要纤维素酶和果胶酶处理以获得原生质体

C．植物体细胞杂交技术的原理是基因重组

D．利用植物体细胞杂交可以获得多倍体植株

8.某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是（ ）

A. 利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗

B. 采用花粉粒组织培养获得单倍体苗

C. 采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上

D. 采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养

9．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是(　 　)

A．将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体

B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体

D．将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

10.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①②③表示其结果，下面说法不正确的是(　 　)

若a是核移植技术，后代不发生基因重组和变异

B．若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能

C．若c是胚胎分割技术，③中个体的产生实质上就是克隆

D．图中所示的三项技术属于动物细胞工程和胚胎工程

11．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )

A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞

B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变

C.恶性细胞系的细胞可进行传代培养

D.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的

12．下列说法不正确的是（ ）

A．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体

B. B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因

C. 利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种

D．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，都须用液体培养基

13.在动物细胞培养的有关叙述中，不正确的是(　　)

A．胚胎工程和基因工程都要利用细胞培养

B．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的分泌蛋白

C．培养至细胞系时遗传物质已发生改变

D．将细胞培养在含有毒物质的溶液中，可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性

14.哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图（N 表示染色体组）据图分析，下列叙述错误的是（ ）

A. 次级卵母细胞形成的过程需要激素调节

B. 细胞III 只有在精子的作用下才能形成成熟卵子

C. II、III 和IV 细胞分裂后期染色体数目相同

D. 培育转基因动物应选择细胞IV 作为受体细胞

15．下列有关受精作用及胚胎发育的说法中，不正确的是( 　)

A．观察卵子是否受精的重要标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体

B．防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和卵细胞膜反应

C．标志着受精作用完成的是两个原核融合形成合子

D．胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化

16．下图为转基因抗病香蕉的培育过程示意图。其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ等为相应限制性内切酶的切点，同时质粒中含有卡那霉素的抗性基因(Kanr)。以下有关培育过程的说法正确的是(　　 )

A. ①过程为脱分化，细胞数目不变

B．①②过程需要激素支持以及二氧化碳培养箱

C．在含抗病基因的DNA和质粒中，均只含有1个PstⅠ限制酶的识别序列

D．用含卡那霉素的培养基培养香蕉组织块时，导入普通质粒的组织细胞也能存活

17.下列有关试管动物技术的叙述不正确的是(　 　)

A．体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精

B．胚胎移植之前需检查精卵细胞的受精状况和受精卵的发育能力

C．早期胚胎发育的过程为：受精卵→桑椹胚→卵裂→囊胚→原肠胚

D．将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫 ,移植入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程 中不受影响

18.单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基嘌呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基嘌呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养(如下图所示)，则小孔中的培养物不可能出现的结果是( )

A.细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性

B.细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性

C.没有活细胞，产生抗体

D.没有活细胞，不产生抗体

19．下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是(　 　)

①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞　②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞　③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养　④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞　⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞　⑥从小鼠腹水中提取抗体　⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合

A．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥

B．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆

C．⑦过程获得的细胞均可无限增殖

D．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选

20．某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养，下列叙述正确 的是 (　 　)

A．制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理

B．肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸

C．为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的干扰素

D．用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增殖周期长

21.下列说法正确的是（ ）

A. 华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有核移植和胚胎移植。

B. 人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割。

C. 利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊时用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎。

D. .胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化。

22．云南农业大学研究人员培育出10头猪蹄发荧光的转基因猪。主要研究过程是①将瘦素基因与绿色荧光蛋白基因导入猪胎儿成纤维细胞；②将转基因的成纤维细胞核移植到去核的猪卵母细胞，并培育形成早期胚胎；③将胚胎移植到代孕母猪体内，最终获得转基因猪。在这一过程中不必进行的是(　 　)

A．将瘦素基因与绿色荧光蛋白基因拼接，并构建基因表达载体

B．培养并筛选处于减数第二次分裂中期的猪次级卵母细胞

C．筛选出转基因猪胎儿成纤维细胞和转基因克隆胚胎

D．给代孕母猪注射环孢霉素A阻止T细胞增殖，以利于代孕母猪接受胚胎

23.如图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所做的一系列研究，过程Ⅰ是将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素。过程Ⅱ是将目的基因导入胚胎干细胞的过程。下列有关叙述不正确的是( )

A.过程Ⅰ的研究利用了胚胎干细胞具有全能性的特点

B.若要对囊胚阶段的胚胎进行分割，注意将滋养层细胞均等分割

C.过程Ⅱ中可用显微注射法将目的基因导入胚胎干细胞

D.若将ES细胞放在添加有分化诱导因子的培养液中，可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。

24．果酒以其独特的风味、制作方便和绿色环保等特点深受人们的欢迎。下列有关果酒制作的叙述中，正确的是( 　)

A．为使葡萄更干净，应该去梗清洗

B．酵母菌在无氧条件下产生酒精，发酵过程始终要严格密封

C．为防止葡萄腐烂，可将发酵装置存放在4℃的环境中

D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖

25.下列说法正确的是（ ）

A.果酒、果醋和腐乳制作使用的菌种都具有细胞壁、染色体、线粒体、DNA和RNA

B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上时不进行严格无菌操作对实验结果影响不大。

C.腐乳制作时，含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳。

D.将豆腐分别置于10℃、20℃、30℃的环境中，观察并比较毛霉生长的情况。

26．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是 ( 　)

A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同

B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒

C．变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落

D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件

27.下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是(　 　)

A．微生物培养前，需要对培养基进行消毒

B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法

C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度

D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源

28.研究者从冰川土样中分离获得了具有较高脂肪酶活性的青霉菌菌株，为了在此基础上获得脂肪酶活性更高的菌株，最可行的做法是（ ）

A．用紫外线照射青霉菌菌株，再进行筛选

B．将青霉菌菌株与能高效水解蛋白质的菌株混合培养，再进行筛选

C．将能高效水解蛋白质的菌株的基因导入青霉菌菌株，再进行筛选

D．设置培养基中各种营养成分的浓度梯度，对青霉菌菌株分别培养，再进行筛选

29．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是( )

A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞

B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株

C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子

D.外植体一般用幼嫩的组织细胞，因为幼嫩的组织细胞脱分化较容易

30. 下列有关微生物培养与应用的说法正确的是(　 )

A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目

B.带有很强致病力的金黄色葡萄球菌实验结束后，培养基经过加热以后才能倒掉

C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段

D.从土壤中分离分解尿素的细菌时,进行初步筛选就可以了，不需要对分离的菌种做进一步的鉴定。

31.自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解。下列相关叙述错误的是(　　)

A．不同微生物的生存环境不同，培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集

B．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养

C．获得图甲、乙效果的接种方法分别是平板划线法、稀释涂布平板法

D．配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整

32.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(　　 )

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

二．非选择题（共52分，除特殊标注外，每空1分）

33.(Ⅰ).chlL基因是蓝藻(蓝细菌)DNA上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答：

甲

(1)构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是____________和_____________________。

(2)若含有chlL基因的DNA片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如下图所示。请回答：

乙

①构建含chlL基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是____________，对_______________ 进行切割。

②同时用酶1和酶4切割图乙中的质粒，则产生含有1 800对碱基和8 200对碱基的两种片段；用图中四种酶同时切割此质粒，则产生含有600对碱基和8 200对碱基的两种片段；若换用酶1和酶3同时切割此质粒，则产生的片段是______________________。

(Ⅱ).科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下 图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答问题：

（1）步骤①和②中常用的工具酶是 和 。

（2）图中质粒上有抗氨苄青霉素和抗四环素两个标记基因，经过①和②步骤后，有些质粒上的 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒，由于目的基因的分隔使得该抗性基因失活。

（3）步骤③是 的过程，为了促进该过程，应该用 处理大肠杆菌。

（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 ，能在C中生长的大肠杆菌有 种。

（5）步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示，含目的基因的菌落位于 （D、E）上。请在图中相应的位置上圈出含目的基因的菌落。

34.(Ⅰ). 细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答：

②过程采用最多的是农杆菌转化法，原因是农杆菌中Ti质粒上的 可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上；检测目的基因是否导人受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用 作探针。

图中③④过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添

加 等物质，作用是 。

（3）若要获取转基因植物人工种子，需培养到 阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养

到 阶段即可。

（4）若采用植物体细胞杂交技术获得新的植物体，细胞间杂交一般采用 作为诱导剂诱导细胞融合，与传统的有性杂交相比，其优势是 。

(Ⅱ).科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 ，培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为

（2）图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为 ，也可从灰鼠体内取出卵子，通过 后进行早期胚胎培养获得。

（3）图中重组囊胚通过 技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。

（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的 分离培养获得.

35.花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是 。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。原生质体经过 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1—4 中一定是杂种植株的有 。

（6）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

36.请分析回答下列与微生物的培养与应用有关的问题：

(1)分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述配方中的成分： ,并加入　　　　　　　　　　,以补充　　　　　　　　　源。

(2)若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233,那么每毫升样品中 的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)　　　　　　　　　　。

(3)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选　　　　　菌,这种培养基被称为　　　　　 　。

（4）研究发现，与某植物A共生的细菌X对受重金属污染的A植物的生长有影响。

①实验一：采集污染地区累积重金属的A植物，从其体内分离得到共生菌X。

a．植物组织块消毒后，用无菌水多次冲洗，将最后一次冲洗过植物组织块的无菌水涂布于适宜的固体培养基上，适宜条件下培养一定时间后，若 ，则证明植物组织块表面已达到无菌状态。

b．在无菌条件下，将经a步骤处理的植物组织块制作浸出液并梯度稀释，涂布于适宜的固体培养基上，培养一定时间后，培养基上出现不同形态的菌落，表明 。

c．将上述步骤中得到的细菌，在含 的选择培养基中培养，从而得到耐重金属的共生细菌X。

②实验二：观察在重金属污染条件下细菌X对A植物生长的影响。

a．将细菌X与体内无细菌的A植物共生培养，得到与细菌X共生的A植物若干株；将等量体内无细菌的A植物作为对照。

b．将上述植物在含不同浓度的重金属培养液中培养，观察其生长状况，结果如图2（忽略植物体中细菌X的重量）。

通过以上结果可以得出的结论是 。

③经检测，重金属在与细菌X共生的A植物组织和对照植物组织中的浓度相同，且单位体积植物组织中水含量相同。结合图2可以得出，与细菌X共生的A植物中重金属的总量较对照植物 （高/低/相等）。

④综上所述，同体内无细菌的A植物相比，与细菌X共生的A植物 （利于/不利于）清除环境中的重金属污染物。

广德中学2013-2014学年度第二学期期中考试高二生物试卷

参考答案：

一．选择题（48分，每题1.5分）

1

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3

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非选择题（52分，除标注外每空1分）

33.（14分）(Ⅰ) (1) 破坏chlL基因　 操作成功后筛选出该变异株

(2) ①酶1和酶3　 质粒和含chlL基因的DNA

②含有1200对碱基和8800对碱基的两种片段

(Ⅱ)（1）限制性核酸内切酶 DNA连接酶 （2）氨苄青霉素抗性基因

（3）将重组质粒（目