本试卷分第Ⅰ卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题)两部分 ，满分100分，考试用时100分钟。

注意事项：

1．答卷前，考生务必用签字笔将自己的姓名、考号填写在试卷和答题卡上。

2．选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案；不能答在试卷上。

3．非选择题必须用签字笔作答，如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改液．不按以上要求作答的答案无效。

4．考生必须保持答题卡的整洁，考试结束后，将第二卷和答题卡收回。

第I卷（选择题 共45分）

一、选择题：（本题包括30小题。每小题1.5分，共45分。每小题只有一个选项最符合题意。）

1．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 (　　)

A．①②③④ B．①②④③ C．① ④ ② ③ D．① ④ ③ ②

2．某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是其热稳定性较差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物消化不良，最佳方案是 ( )

A．替换此酶中的个别氨基酸，以改善其功能

B．将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶

C．重新设计与创造一种蛋白酶

D．减少此酶在片剂中的含量

3．下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是 ( )

A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织

D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因组成相同

4．下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是 (　　)

A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列

B．限制性核酸内切酶的活性受温度影响

C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNA

D．限制性核酸内切酶可从原核生物中提取

5．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞，使其表达，产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因；A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是( )

A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒

B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶

C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．在含氨苄青霉素的培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

6．下列有关植物体细胞杂交的叙述，错误的是( )

A．有可能把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上

B．需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁

C．利用聚乙二醇可以促进原生质体融合

D．植物体细胞杂交就是将不同的植物体细胞融合成杂种细胞

7．北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是 ( )

A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序

B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白

C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选

D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达

8．将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 ( )

A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒

B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada

D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子

9．下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中关于单克隆抗体制备的相关叙述，错误的是 ( )

①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将x抗原注入小鼠体内，获得能产生抗x抗体的B淋巴细胞③将杂交瘸细胞注入小鼠腹腔内培养④筛选出能产生抗x抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从小鼠腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合

A．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥

B．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆

C．⑦过程获得的细胞均可无限增殖

D．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选

10．关于动物细胞培养，下列叙述错误的是 ( )

A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织

B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞

C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液

D．动物细胞培养只能传至50代左右，所培育的细胞会衰老死亡

11．单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基喋呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养（如图所示）。则小孔中的培养物不可能出现的结果是 ( )

A．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性

B．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性

C．没有活细胞，产生抗体

D．没有活细胞，不产生抗体

12．下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是 (　　)

A．构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

B．愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株

C．卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点

D．抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传

13．蛋白质工程与基因工程相比，其突出特点是 (　　)

A．基因工程原则上能生产任何蛋白质

B．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质

C．蛋白质工程可以不通过转录和翻译来实现

D．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第三代基因工程

14．下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是 (　　)

A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶

C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶

15．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述，正确的是 (　　)

A．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍

B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵

C．在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中

D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA

16．下图是某转基因抗虫水稻培育流程简图。下列有关分析错误的是 ( )

A．该过程涉及基因工程和植物组织培养技术

B．毒蛋白基因在转基因抗虫水稻中的表达需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

C．可用带荧光标记的毒蛋白抗体检测毒蛋白基因是否在水稻细胞中表达

D．转基因抗虫水稻的种植可能导致昆虫群体抗毒蛋白基因频率增加

17．我国科学工作者培育的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于 ( )

A．苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因 B．棉铃虫变异形成的致死基因

C．寄生在棉铃虫体内的线虫基因 D．普通棉的突变基因

18．科学家依据基因工程的原理最新研制的某种疫苗是用病原微生物编码抗原的基因制成的，这个基因编码的产物能诱导机体产生免疫反应。该疫苗 ( )

A．引起人体特异性免疫的原因是DNA分子上具有抗原

B．引起免疫反应后相应淋巴细胞增多，细胞周期将变长

C．能与浆细胞产生的相应抗体发生特异性结合

D．包括抗原基因、启动子、终止子和标记基因等

19．下列叙述不合理的是 ( )

A．萌发的种子可作为诱变育种的材料 B．植物分生区细胞可用于培育脱毒苗

C．带芽的枝条可提高扦插的成活率 D．乳腺细胞可作为转基因动物的受体细胞

20．下列说法正确的是 ( )

A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端形成氢键，实现黏性末端的黏合，形成重组DNA

B．限制性核酸内切酶的切割位点是DNA中磷酸和碱基之间的磷酸二酯键

C．T4 DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的黏性末端又可以连接双链DNA片段的平末端

D．用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物杂交育种

21．某农学院对玉米(2N=20)的花粉进行离体培养和再生植株的研究（图示如下），下列有关叙述哪些是不正确的 ( )

A．图示过程在育种中称为单倍体育种

B．在花粉形成过程中等位基因分离，非同源染色体的非等位基因自由组合

C．对培养基进行灭菌，对花粉进行消毒后才能进行接种和培养

D．花粉离体培养得到的植株有10条染色体，是单倍体

22．关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 ( )

A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质

B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体

C．植物细胞培养技术可用于植物茎尖脱毒

D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育

23．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的 ( )

A．1 B．2 C．3 D．4

24．下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是( )

A．给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞

B．B细胞与骨髓瘤细胞混合培养，是为了获得融合细胞

C．杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体

D．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎

25．对细胞全能性的表达正确的是 (　 )

A．离体的植物细胞均能够表现出全能性

B．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现

C．花粉可培育成单倍体植株是细胞全能性的表现

D．单克隆抗体的制备依据的原理是细胞的全能性

26．动物细胞融合和植物原生质体融合比较，特殊性表现在 (　　)

A．融合的原因 B．融合的优点

C．融合的诱导手段 D．融合的过程

27．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 (　　)

A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体

B．培养中的人B细胞能够无限地增殖

C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株

D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞

28．单克隆抗体(单抗)实质上是单个浆细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是 (　　)

A．单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位

B．单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术

C．在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选

D．只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞

29．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是 (　　)

A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同

B．有无血清对正常细胞培养的影响不同

C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养

D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大

30．关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是 (　　)

A．对小动物注射特定抗原以获取所需的B细胞

B．融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养

C．特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染

D．治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞

生物试卷 2013-3

第Ⅱ卷(非选择题，共55分)

二、非选择题：(本题包括6小题，共55分。)

31．（7分）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列。图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、Sma I 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC，CCC↓GGG。请回答下列问题：

(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次

由 连接。

(2)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 末端，其产物长度为 。

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，产物中

共有 种不同长度的DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加 的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是 。

32．（10分）人们应用生物工程技术可以获得所需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)获得抗虫基因的常用方法是 ，利用 进行大量扩增；而获取人胰岛素基因还可通过 法进行人工合成。

(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素技术中图⑤所示过程一般要先用 处理受体细胞，然后进行细胞转化。人们发现利用大肠杆菌生产的胰岛素活性往往较低，可能的原因是 。

(3)利用基因工程生产单克隆抗体时，一般采用 技术将无限增殖基因

导入 细胞中，然后进行 和 筛选出分泌所需抗体的特定细胞进行扩大培养，进而提取单克隆抗体。

(4)单克隆抗体还可以通过培养由 融合而成的杂交瘤细胞进行大量制备。

33．（7分）下图为利用生物技术获得抗虫棉的过程示意图。据图回答：

(1)在培育转基因植物的过程中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。A过程需要的酶有 、 。C过程的培养基除含有必要的营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 。

(2)离体棉花叶片组织经C、D过程成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是 ，该技术的原理是 。

(3)科学家将植物细胞培养到 ，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。

(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用 作为探针。

座号







34．（7分）如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答下列问题：

(1)图中②所示的结构名称是 。

(2)图中过程③④所示的生物技术名称分别是 、 。

(3)过程③通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它 。

(4)过程④通常用②作受体细胞的原因是 。

(5)与一般的异体移植相比，图示方法最大的优点是 ，该种基因治疗所属

类型为 。

35．（13分）干扰素是动物体内合成的一种蛋白质，可以用于治疗病毒感染和癌症，但体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在－70℃条件下保存半年，给广大患者带来福音。

(1)蛋白质的合成是受基因控制的，因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基因是生产的关键，依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产“可以保存的干扰素”：



(2)基因工程和蛋白质工程相比较，基因工程在原则上只能生产 的蛋白质，不一定符合 需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过 或 ，对现有蛋白质进行________，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需要。

(3)蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质具有十分复杂的 结构。

(4)对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？__________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

原因是：__________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

36．(11分)自然界中有一种含有叶绿体的原生动物——眼虫，这说明植物的细胞器

同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可

以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。

结合实验方案回答：

实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂

交的。

实验步骤如下：

(1)①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是________。

(2)③过程所用的酶是______________________________。

(3)④过程除了用电激之外，还可以用 、

等作为诱导因素。

(4)⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是 、

、 、 。

(5)在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可

以在培养基上面迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会

和 争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量 导

致培养物迅速死亡。

(6)在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是

。

 生物试卷

参考答案

选择题：

非选择题：

31．（7分）(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖 (2)平 537 bp、790 bp、661 bp

(3)4 (4)BamH I 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接

32．（10分）(1)从基因文库中获取 PCR技术 反转录（或DNA合成仪）

(2)Ca2+ 原核细胞没有内质网及高尔基体，对蛋白质不能进一步加工

(3)显微注射 浆（或已免疫的B淋巴） 克隆化培养 专一抗体检测

(4)已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞

33．（7分）(1)限制性核酸内切酶 DNA连接酶 卡那霉素 (2)植物组织培养 植物细胞的全能性 (3)胚状体 (4)放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基困

34．（7分）(1)内细胞团（胚胎干细胞）

(2)核移植技术 转基因技术（基因工程、DNA重组技术）

(3)含有促进细胞核全能性表达的物质

(4)这些细胞分化程度低，全能性高，可以定向诱导分化为各类细胞

(5)没有排斥反应 体外基因治疗

35．（13分，除标明外，每空1分） (1)预期蛋白质的功能　蛋白质三维结构　应有的氨基酸序列　相应的脱氧核苷酸序列(基因)　(2)自然界已存在　人类生产和生活　基因修饰　基因合成 改造　(3)空间(或高级)　(4)应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质的改造　第一，任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因也就是对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以通过改造过的基因遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子也无法遗传；其次，对基因进行改造比对蛋白质直接进行改造要容易操作，难度要小得多（2分）

36．（11分）(1)叶绿体　(2)纤维素酶和果胶酶　(3)灭活的病毒　聚乙二醇　振动　离心(任写两种)　(4)无菌、无毒的环境　充足的营养　适宜温度和pH　气体环境　(5)培养物　对培养物有害的物质　(6)人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，通常加入血清、血浆等一些天然成分