考试时间：90分钟 满分：90分 出题人：侯宝祥 审核人: 闫秀波

一、选择题（每题只有一个正确选项，每小题1分，共30分）

1.限制酶SmaI识别的核苷酸序列和切割位点是
,由该酶同时切割目的基因和质粒后,再将其连接成重组质粒,连接时需要下列哪种酶( )

A.热稳定DNA聚合酶

B.T4DNA连接酶

C.E.coli DNA连接酶

D.T4DNA连接酶或E.coli DNA连接酶

2.关于启动子的说法正确的是（ ）

A.是DNA聚合酶识别和结合的部位

B.位于mRNA的首段

C.是基因表达载体的组成部分，其化学本质是DNA

D.与终止子共同调控目的基因的转录和翻译

3.科学家依据基因工程最新研制的某种疫苗是用病原微生物编码抗原的基因制成的，这个基因编码的产物能诱导机体产生免疫反应，有关该疫苗的下列说法正确的是（ ）

A.引起人特异性免疫的原因是DNA分子上具有抗原

B.引起免疫反应后，相应的淋巴细胞增多，细胞周期将变长

C.能与浆细胞产生的相应抗体发生特异性结合

D.该疫苗包括抗原基因、启动子、终止子和标记基因等

4.下图是某转基因抗虫水稻培育流程图，下列有关分析错误的是（ ）

A.该过程涉及基因工程技术和植物组织培养技术

B.毒蛋白基因在转基因抗虫水稻中的表达需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

C.可用带荧光标记的毒蛋白抗体检测毒蛋白基因是否在水稻细胞中表达

D.转基因抗虫水稻的种植可能导致昆虫群体抗毒蛋白基因频率增加

5.某学院对玉米(2N=20)的花粉进行离体培养和再生植株的研究(如图所示),下列有关叙述错误的是( )

A.a过程包括脱分化和再分化

B.b过程用适宜浓度的秋水仙素处理

C.花粉形成时等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合

D.再生植株为单倍体，含10条染色体

6.科学家利用基因工程技术，可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”，下列有关说法错误的是（ ）

A.该哺乳动物被称为生物反应器

B.科学家在培育乳房生物反应器时,将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因重组

C.目的基因导入的受体细胞通常是受精卵，导入方法通常用显微注射法

D.培育该哺乳动物除应用基因工程技术外，还一定用到胚胎移植技术和早期胚胎培养技术

7.下列关于动物细胞培养的叙述正确的是（ ）

A.培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞?

B.克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变?

C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的?

D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养

8.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体，下列叙述正确的是（ ）

A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体

B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞

D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

9.关于基因探针的应用下列说法错误的是（ ）

A.可用于疾病的诊断以及环境的检测

B.检测目的基因是否表达

C.能鉴定物种间的亲缘关系

D.能够从基因文库中准确地提取目的基因

10.第三代试管婴儿技术也称胚胎植入前遗传学诊断，指在胚胎移植前，取胚胎细胞的遗传物质进行分析，筛选出健康胚胎进行移植的方法，下列有关说法错误的是（ ）

A.胚胎植入前遗传学诊断过程需要进行羊膜腔穿刺取羊水细胞?

B.体外受精后，必须经过胚胎体外培养后才能进行胚胎移植?

C.胚胎移植的受体从技术上来说没有必要一定是胚胎的遗传学母亲?

D.第三代试管婴儿技术的成熟并不意味着大家可以随意选择和定制孩子

11.为了防止转基因作物的目的基因通过花粉转移到自然界中其他植物中，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的线粒体（或叶绿体）基因组中，其原因是（ ）

A.线粒体基因组不会进入到生殖细胞中?

B.受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞

C.转基因植物与其他植物间不能通过花粉发生基因交流

D.植物杂交的后代不会出现一定的性状分离比

12.随着生物技术的迅速发展，已灭绝生物的“复活”将不再是神话，如果世界上最后一只野驴刚刚死亡，下列“复活”野驴的方法中，最可行的是(　　)

A.将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体

B.取出野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C.取出野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体

D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

13.软骨发育不全为常染色体显性遗传病,基因型为 HH 的个体早期死亡，一对夫妻均为该病患者,希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子，下列做法错误的是（ ）

A.首先经超排卵处理后进行体外受精

B.从囊胚中分离细胞,培养后检测基因型

C.根据检测结果筛选基因型为 hh 的胚胎

D.将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫

14.华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有（? ）

①转基因??②核移植??③体外受精??④体细胞克隆??⑤胚胎移植

A．①③????B．①④????C．②⑤????D．③⑤

15.医学研究表明人的角膜、妊娠的子宫等都能容忍外来的抗原蛋白,而不发生免疫排斥反应,这种现象在医学上称为“免疫赦免”，这为人的胚胎移植提供了哪方面的理论支持（ ）

A.能够在供体内收集到早期胚胎

B.移入到受体的胚胎能够保留供体胚胎的遗传特性

C.移入的胚胎能够在受体内存活

D.供体胚胎可以移入到受体子宫

16.下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是(　　)

①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞

②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞

③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养

④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞

⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞

⑥从腹水中提取抗体

⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合

A.实验顺序应当是①②⑦⑤④③⑥

B.③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆

C.⑦过程融合后获得的细胞类型有三种

D.利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选

17.下列关于哺乳动物生殖细胞的发生和受精的叙述正确的是（ ）

A.透明带反应是防止多精入卵的唯一屏障

B.动物卵细胞的形成始于初情期

C.猪、牛、羊等哺乳动物排卵时排出的卵母细胞在透明带和卵细胞膜间隙有第一极体

D.精子顶体不能释放蛋白质

18.在生产单克隆抗体实验操作中时要在培养基中加入一定的试剂筛选出杂交瘤细胞，下列可作为这种试剂的是( )

A.能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制的试剂B.能激活淋巴细胞的原癌基因的试剂C.能阻止杂交瘤细胞的核糖体上所有蛋白质的合成的试剂D.能抑制淋巴细胞的DNA复制的试剂

19.下列对基因结构的认识中，正确的是( )

A.小麦细胞基因的编码区中存在非编码序列

B.花生细胞基因结构中内含子存在于编码区，是能编码蛋白质的序列

C.金黄色葡萄球菌的基因与RNA聚合酶结合点位于编码区下游

D.乳酸菌与酵母菌基因结构中，都存在外显子和内含子

20.下图列举了几种植物的育种方式，据图分析下列说法中正确的是( )

A.丁过程需要经过脱分化

B.乙方式通常用射线处理植物的试管苗能获得较好效果

C.甲、丙两种育种方式与传统杂交育种相比，其优点是能克服不同物种间远缘杂交的不亲和性

D.丙方式将外源目的基因导入植物细胞，只能以受精卵作为受体，因为受精卵大，容易操作

21.转基因技术就是对某一物种具有的特别性状的基因进行分离，并把它移到另一物种上去，从而使另一物种具有组合基因。然而转基因技术也会带来负面影响。从下列选项中选出不是由转基因生物可能带来的弊端（ ）

A.对生物多样性的影响，如抗除草剂作物的产生会破坏农田生物多样性

B.使近亲野生物种具有抗性基因，从而可能会变成“超级杂草”

C.转基因生物的食品加工带来食品污染

D.转基因生物的大规模繁殖导致生物入侵

22.下列关于哺乳动物受精和发育的叙述，正确的是（　　）

A.雌性动物排卵后遇精子即完成受精

B.胚胎发育至囊胚时即已开始了细胞分化，这是基因进行选择性表达的结果

C.动物胚胎分割可以看作有性生殖的一种方式

D.动物的个体发育过程是：受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚

23.老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β-淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β-淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（　　）

A．胚胎移植技术 B．胚胎干细胞技术

C．单克隆抗体技术 D．基因治疗技术

24.既可进行胚胎性别鉴定，又能进行胚胎移植的最佳示意图是( )

25.下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。叙述正确的是(　　)

A.此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性

B.①②过程中都会发生细胞的增殖和分化

C.多倍体植株的培育需经过如图所示过程

D.利用此过程获得的试管苗可能为杂合子

26.基因治疗是把健康的外源基因导入（　　）

A.有基因缺陷的细胞中

B.有基因缺陷的染色体中

C.有基因缺陷的细胞器中

D.有基因缺陷的DNA分子中

27.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（　　）

A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织

D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同

28.下列关于囊胚和桑椹胚的说法不正确的是（ ）

A.桑椹胚各细胞的结构基本相同

B.囊胚期出现了囊胚腔

C.囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的

D.囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫孵化

29.下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是(　　)

A.卵裂期胚胎体积和细胞数目都在不断增加

B.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割

C.胚胎干细胞是未分化的细胞,可从早期胚胎中分离获取

D.胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点

30.某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的( )

植物细胞工程

动物细胞工程



技术手段

植物组织培养、植物体细胞杂交

动物细胞培养和融合、单克隆抗体的制备



特殊处理

机械法去除细胞壁

胰蛋白酶处理，制成细胞悬液



融合方法

物理方法、化学方法

物理方法、化学方法、生物方法



典型应用

人工种子、杂种植株

单克隆抗体的制备



培养液区别

生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

动物血清不可缺少



A.1 B.2 C．3 D．4

二、简答题（共60分）

31.(9分)某城市在建设过程中，更加注重生态文明的建设。如利用人工建立的湿地公园对生活污水进行净化处理，形成藻菌共生的污水净化系统，还可以利用藻类蛋白养鱼、养鸭等获得良好的经济效益。下面是利用人工湿地净化生活污水的原理简图,请据图回答问题：

(1)输入人工湿地的能量为________________

(2)人工湿地中的芦苇属于挺水植物，绿藻属于浮游植物，黑藻属于沉水植物，这一现象体现了群落具有________结构。该人工湿地的建设体现了生态工程的基本原理有_______等(至少回答两个)。

(3)用恰当的箭头和文字完成该人工湿地的碳循环图解。

(4)某生物兴趣小组在实地调查了该人工湿地后，在大力赞赏利用湿地对生活污水进行净化处理的同时，还向相关部门提出了应加强对重点污染源的控制这一合理的建议，其依据的生态学理由是______________________________________

(5)为了检验污水处理的效果，常测定BOD5（5日生化需氧量）的值，BOD5通常指20℃下，1L污水中所含有机碳源在微生物氧化时，5日内所消耗分子氧的毫克数。若假设原来100mL污水中的有机物含量为2.1g，等价于1.8g葡萄糖的耗氧量，污水处理后测得BOD5的值为190mg/L，则污水净化率达到_____左右（以BOD5减少的百分率表示）。

32.(12分)从1978年7月25日世界上第一位“试管婴儿”诞生，至今全球试管婴儿数量已达到400万。1996年7月5日克隆羊“多利”诞生，至今已成功克隆了多种动物,请分析回答试管婴儿与克隆技术的有关问题：

(1)试管婴儿和克隆动物的培育过程中均会用到的生物技术有___________、__________

(2)试管婴儿首先需要进行体外受精,利用化学诱导法进行获能时需将精子放在 或 溶液中。

(3)培育试管婴儿时，可通过给母体注射_____________增加排卵数量。

(4)克隆动物时，将甲个体的细胞核移入乙个体去核的卵细胞中，由重组细胞培育成个体丙，个体丙的性状主要与甲相似，其原因是 ，但丙的性状又不完全与甲相同，其原因是 ① ②

（5）设计试管婴儿技术，为治疗白血病等人类疾病开辟了广阔前景，与试管婴儿技术相比，该技术在操作过程中需进行 ，为防止设计试管婴儿技术的滥用，我国制定了《体外受精—胚胎移植及其衍生技术规范》，其中明确规定，禁止将此技术用于设计试管婴儿 等。

（6）关于克隆人，我国政府的态度是明确的，一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何 的实验，但是不反对

33.(10分)烟草花叶病毒（TMV）是一种在烟草及蔬菜等经济作物种广泛传播的病毒，对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因（CP基因）导入烟草并在转化的烟草植株中表达，使其获得对烟草花叶病毒的抗性，下图是转化烟草植株的培育流程，请回答：

（1）含有CP基因的cDNA文库是通过TMV的RNA进行 获得的，在对cDNA进行PCR扩增时，为防止引物间结合在一起，设计的引物不能含有 序列。

（2）在基因工程中转化是指 ，并在 的过程。

（3）在转基因过程中，首先将CP基因插入到土壤农杆菌质粒的 上，然后将其导入到受体细胞中，这里的受体细胞指 （填土壤农杆菌或烟草叶肉细胞），最后培育出抗烟草花叶病毒的植株。这种转化放在在植物基因工程中经常采用，称为

（4）用含重组质粒的土壤农杆菌感染烟草叶成功后，培养形成愈伤组织时的培养条件必须是在保证无菌无毒的条件下进行 。在诱导芽、根的培养基中需添加 才能进行筛选，并需要注意在不同的培养阶段需要调整 比例。

34．（11分）据图回答下列问题：

实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的，实验步骤如下。

（1）①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是______

（2）④过程除了用电激之外，还可以用________、__________等作为诱导因素。

（3）⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是_________，合适的________、________、________

（4）在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基上面迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和______争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量__________，导致培养物迅速死亡。

（5）在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是____________________________________

35.(10分)普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如下。请分析回答：

（1）①和②过程中所用的限制性内切酶分别是 、

（2）基因表达载体除了图示组成外，还应有终止子和

（3）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是 和

（4）④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中，在高渗透压溶液环境中用 酶来制备原生质体。转化后的细胞再通过 形成植物体。

（5）导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达，其意义是

36．（8分）请根据以下提供的实验材料，完善生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用的实验思路，并预测实验结果。

实验材料：培养液、正常体细胞、癌细胞、W、胰蛋白酶

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且培养条件适宜）

请回答：

（1）实验思路：

①取培养瓶若干个，分组如下：

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

每组设置若干个重复样品。

②各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，各取其中的几个样品，加入________，摇匀，在显微镜下用血细胞计数板分别计数并记录细胞数。

③重复②若干次。

④________________________________________________________________________

（2）预测实验结果（用坐标系和细胞数变化曲线示意图表示）：