本试卷分第I卷（选择题）和第1I卷（非选择题）两部分，共120分。考试用时100分钟。

第Ⅰ卷（选择题 共55分）

一、单项选择题：本部分包括20小题，每小题2分，共计40分。每题只有一个选项最符合题意。

1、基因工程技术引起的生物变异属于（　　）

A．染色体变异 　 B．基因突变 C．基因重组 D． 不可遗传的变异

2、限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是（　　）

A、G与A之间的键 B、G与C之间的键

C、A与T之间的键 D、磷酸与脱氧核糖之间的键

3、下面图中a、b、c、d代表的结构正确的是：（ ）

A．a—质粒RNA B．b—限制性外切酶 C．c—RNA聚合酶 D．d—外源基因

4、科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为( )

A、基因工程?　　 ? B、蛋白质工程 C、基因突变??　? D、细胞工程

5、钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知（　　）

A．该生物的基因型是杂合的

B．该生物与水母有很近的亲缘关系

C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达

D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光

6、 下列关于基因工程及其产品的说法中，错误的是（　　）

A. 基因工程的核心是基因表达载体的构建

B. 基因工程可定向地改造生物遗传性状

C. 消费者对转基因产品应该有选择权

D. 基因工程产生的变异属于染色体变异

7、在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ）

A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸

B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体

C.将重组DNA分子导入原生质体

C.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

8、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( )

A．限制酶只用于切割获取目的基因

B．载体与目的基因通常用同一种限制酶处理

C．基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶

D．带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测

9、下列关于转基因植物的叙述。正确的是（ ）

A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中

B．转抗虫基因的植物．不会导致昆虫群体抗性基因频率增加

C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达

D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题

10、下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）

A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物

B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶

C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性

D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

11、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定的培养基中培养，获得了许多完整的植株，此过程依据的原理和技术是( )

A． 细胞分裂和细胞工程 B． 细胞分化和基因工程

C． 细胞的全能性和组织培养 D． 花药离体和单倍体育种。

12、下列关于细胞工程的叙述，错误的是 ( )

A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体

D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同

13、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称分别为( )

A．抗体、T淋巴细胞 B．抗原、T淋巴细胞

C．抗体、B淋巴细胞 D．抗原、B淋巴细胞

14、下列关于细胞工程的叙述，不正确的是　（　　）

A．植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性

B．动物细胞融合的过程包括杂交细胞形成和杂交新个体形成

C．细胞融合包括质融合和核融合，细胞壁形成是融合完成的标志

D．二倍体生物细胞融合后，遗传物质为二个细胞遗传物质的组合

15、某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（ ）。

比较内容

植物细胞工程

动物细胞工程



A

特殊处理

酶解法去除细胞壁

用胰蛋白酶处理后制成细胞悬浮液



B

融合方法

物理方法、化学方法、生物方法

物理方法、化学方法



C

典型应用

人工种子、种间杂种植物

单克隆抗体的制备



D

培养基区别

蔗糖是离体组织赖以生长的成分

动物血清不可缺少



16、胚胎干细胞的特点是 （ ）

A．不受机体控制，连续进行分裂 B．活性降低，水分减少

C．体积小，细胞核大，核仁明显 D．细胞核体积增大，染色质固缩

17、哺乳动物(如牛、羊等)是人类生活中一种重要的肉制品、皮毛制品的原料来源，但哺乳动物妊娠时间长，每胎产仔数少，繁殖速度比较慢。要加快优良种畜的繁殖速度，目前最好的方法是采用（ ）

A．动物细胞培养 B．胚胎移植 C．动物细胞融合 D．核移植

18、通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是（ ）

A．对供体和受体母牛都要进行相同激素处理

B．受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行

C．对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植

D．胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低

19、下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（ ）

A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B．培养中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织

D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同

20、下图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物紫草素，应分别选用编号是的 （ ）

A．④② B．③② C．③④ D．④③

二、多项选择题：本部分包括5小题，每小题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，其他情况不得分。）

21、新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是（ ）

A.PCR技术——扩增蛋白质 B.杂交瘤技术——制备单克隆抗体

C.显微注射技术——将目的基因导入植物细胞 D.花粉离体培养——培育单倍体植物

22、人们常用DNA进行亲子鉴定。其原理是：从被测试者的血滴或口腔上皮提取DNA，用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的DNA“探针”去寻找特定的目的基因。DNA“探针”与相应的基因凝聚在一起，然后，利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。被测试者这种肉眼可见的条码很特别，一半与母亲的吻合，一半与父亲的吻合。反复几次过程，每一种探针用于寻找DNA的不同部位形成独特的条码，用几组不同的探针，可得到超过99.9%的父系分辨率。下列关于DNA“探针”的说法不正确的是：（ ）

A．某一个完整的目的基因 B．目的基因片段的特定DNA

C．与目的基因相同的特定双链DNA D．与目的基因互补的特定单链DNA

23、下列事实能体现细胞全能性的是（ ）

A．棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B．单细胞的DNA在体外大量扩增

C．动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D．小鼠体细胞经诱导培育成小鼠

24、某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是　　（ ）

A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理

B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸

C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素

D．在相同适宜条件下培养等量的甲、乙细胞，一段时间后，甲细胞数量比乙多

25、下列关于细胞的叙述，正确的是（ ）

A.自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应

B.胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化

C.组织的细胞更新包括细胞凋亡和干细胞增殖分化等过程

D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病

、简答题：本题包括10小题，共65分。

26、（8分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有　 　　和　 　　。

（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　 　　。

（3）反转录作用的模板是　 　　，产物是　　 　。若要在体外获得大量反转录产物，常采用　　 　技术。

（4）基因工程中除质粒外，　　　　也可作为运载体。

（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是　　　　 　　　。

27、（8分）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（１）过程①中最常用的运载工具是______，所需要的酶是限制酶和_________。

（２）在过程②中，用_______处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是______________。

（３）在过成③中，用_________处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_________处理。

（４）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术可获得较多胚胎。

28、(6分)2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 ，理由是： 。

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是 。

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免 。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

29、（8分）下图是植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答：

（1）第①步是去掉细胞壁，分离出原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用 和 等分解植物的细胞壁。

（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。通常用___________等试剂诱导融合，动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。

（3）杂种细胞形成的标志是 ，此结构的产生与细胞内 (细胞器)有密切关系。在④⑤过程中，细胞分裂的主要方式是 。杂种细胞能被培养成植株的根本原因是 。

30、（8分）)禽流感疫情有逐渐蔓延的趋势。现在，科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H7N9亚型禽流感病毒(一种RNA病毒)。 若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体，请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题：

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自 体内的 细胞，促进d过程的常用诱导剂是 。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用选择培养基筛选出 (填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是 。

(3) 由D细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有 的特点。

(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是 。

31、（7分）)世界卫生组织解释克隆为“遗传上同一的机体或细胞系(株)的无性繁殖”。相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难，下图表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，据图回答下列问题：

(1)方法2获得的小牛的遗传物质来源于 。方法3中①和②发育成的小牛的遗传物质 。(相同／不同)

(2)细胞B取自囊胚的 ，具有全能性，称为 细胞。囊胚 (已经／尚未)出现分化。

(3)应用图示方法 得到小牛与供体1遗传物质最相似。

(4)克隆也可以理解为复制、拷贝，结合世界卫生组织的定义，你认为还有哪些现代生物技术也属于克隆 。

32、（5分）2n/4n 嵌合体胚胎是指用四倍体 (4n )胚胎与二倍体胚胎(2n )或胚胎干细胞 (ES 细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n嵌合体胚胎的构建

常用方法如下图，请据图分析回答：

（1）受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞达到 时期，才具备受精的能力，而精子需经过 过程才能和卵细胞结合。

（2）2N的ES细胞来自胚胎发育过程的 期，本实验中从功能上说明了该细胞

（3）2n/4n 嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有：

33、（8分）蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。请根据资料和图解回答下列问题：

?

(1)构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由标记基因?、? ???? ???、 、终止子等部分组成。

(2)过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是?? ? ????? ????。?过程③采用的生物技术为 。通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从??? ??? ??中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。

(3)如果将过程③获得的早期胚胎进行如图分割，则操作正确的是? ????? ???????。

(4)通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有??? ?? 和??? ? ?等突出优点。

34（7分）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。

（2）若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 末端，其产物长度为 。

（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有 种不同DNA片段。

（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加 的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是 。

1

2

3

4

5

6

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9

10



C

D

D

B

C

D

A

A

A

D



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C

D

D

B

B

C

B

D

D

B



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22

23

24

25













BD

ABC

AD

CD

ACD













26、（１）平末端和粘性末端 （２）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 （３）mRNA 单链ＤＮＡ　　　ＰＣＲ（聚合酶链式反应）

（４）动植物病毒　　λ噬菌体的衍生物

（５） 未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱

27、（1）质粒? ?DNA?连接酶??

（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶?）?? 维持培养基（液）的pH

（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）??? ? 去核??

（4）（早期）胚胎培养??? ?胚胎分割

28、（1）可以连接 因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是 可以互补的） 2）显微注射技术

（3）为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因 ; 发生免疫排斥反应 （4）②①③④

29、（1）纤维素酶 果胶酶 （2） 聚乙二醇 灭活的病毒

(3) 再生出细胞壁 高尔基体 有丝分裂 植物细胞具有全能性

30、（1）感染病毒的动物或人 效应B　　聚乙二醇（PEG）

（2）3 　 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞

(3)特异性强、灵敏度高、化学性质单一

（4）B → A ↘ ↗ D ↘

C → G F

E ↗ ↘ H ↗