1.质粒之所以能作为基因工程的载体，其理由是(　　)

A．含蛋白质从而能完成生命活动

B．具有环状结构而保持连续性

C．RNA能指导蛋白质的合成

D．能够自我复制、能携带目的基因

2．限制酶可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamH Ⅰ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ及Bgl Ⅱ的辨识序列及每一种限制酶的特定切割部位。

其中切割出来的DNA片段末端可以互补结合的两种限制酶是(　　)

A．BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ　　 B．BamH Ⅰ和Hind Ⅲ

C．BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ D．EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ

3．结合右图判断，有关基因工程中工具酶功能的叙述中，正确的是(　　)

A．切断a处的酶简称内切酶，被称为“基因剪刀”

B．连接a处的酶为DNA聚合酶，被称为“基因针线”

C．RNA聚合酶可通过识别基因中的特定碱基序列与DNA分子结合

D．切断和连接b处的酶分别是解旋酶和DNA连接酶

4．目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是(　　)

①检测受体细胞是否有目的基因 　 ②检测受体细胞是否有致病基因 　③检测目的基因是否转录mRNA　④检测目的基因是否翻译蛋白质

A．①②③ B．②③④

C．①③④ D．①②④

5．如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是(　　)

A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法

B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌

C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌

D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长

6．利用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是(　　)

A．常用同一种的限制性内切酶处理目的基因和质粒

B．DNA连接酶和RNA聚合酶是重组质粒形成过程必需的工具酶

C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

7．[2014·西安联考]如图所示是一项重要生物技术的关键步骤，其中X(　　)

A．一定是能合成胰岛素的细菌

B．一定是能合成抗体的人类细胞

C．有可能是能合成胰岛素的细菌

D．一定不是能合成抗生素的细菌

8．下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是(　　)

A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度

B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝

C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取

D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少

9．科学家将β干扰素基因进行定点突变后导入大肠杆菌，表达出的干扰素的第十七位氨基酸由半胱氨酸变成了丝氨酸，新表达的干扰素不仅大大提高了β干扰素的抗病活性，还提高了其储存稳定性。该生物技术为(　　)

A．基因工程 B．蛋白质工程

C．基因突变 D．细胞工程

10．下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanR)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是(　　)

A．构建重组质粒过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶

B．愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株

C．卡那霉素抗性基因(kanR)中有该过程所利用的限制性内切酶的识别位点

D．抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传

11．下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是(　　)

A．基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质

B．蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成

C．当得到可以在－70 ℃条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成

D．基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的

12．如图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ在内的多种酶的酶切位点。

据图回答：

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、________、________三种。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是__________________________。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是________，其合成的产物是________。

(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒自身环化，酶切时应选用的酶是________。

13．[2014·淮安三调]下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。

资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达[5’AOX1和3’AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。

资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。

(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上________、________限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。

(2)酶切获取HBsAg基因后，需用________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取________。

(3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡那霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用________方法进行检测。

14．已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为研制预防SARS病毒的疫苗开展了前期研究工作，其简要的操作流程如下：

(1)实验步骤①需要一种特殊的酶，该酶是________。

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶有________和________。为了使S基因和载体结合，需要注意的是________，原因是________________________________________。

(3)经过④、⑥产生的S蛋白________(填“一样”或“不一样”)，原因是______________________________。

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用________与________进行抗原—抗体特异性反应实验。

15．胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射到人体后，会堆积在皮下，要经过较长的时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，因此，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计速效型胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题：

(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是________。

(2)通过DNA合成形成的新基因应与________结合后转移到________中才能得到准确表达。

(3)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有________、________和发酵工程。

(4)图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么？

答案：

1. D

2． C

3． C

4． C

5． C

6． B

7． C

8． C

9． B

10． A

11．C

12． (1)目的基因—载体连接物 　载体—载体连接物

目的基因—目的基因连接物 　 (2)载体—载体连接物

目的基因—载体连接物、载体—载体连接物 　(3)启动子 　 mRNA　(4)EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ(不能只答一种酶)

13． (1)SnaB Ⅰ　Avr Ⅱ　(2)DNA连接酶 　大量重组质粒 　 (3)Bgl Ⅱ 　 (4)DNA分子杂交