命题人：张桃英 审题人：姜述林 2015.4

第I卷

一．单项选择题：（40小题，每小题1.5分，共60分）

1.下列有关基因工程的叙述，正确的是：（ ）

A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来

B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变

C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外

D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等

2. 下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是

A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列

B.限制性内切酶的活性受温度的影响

C.限制性内切酶能识别和切割RNA

D.限制性内切酶可从原核生物中提取

3. 依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是（ ）

A．切断a处的酶为限制性内切酶

B．连接a处的酶为DNA连接酶

C．切断b处的酶为DNA解旋酶

D．作用b处的酶为限制性内切酶

4. 采用基因工程的方法培养抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确的是

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中

②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中

③将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组导入细菌，用该细菌感染棉花体细胞，再进行组织培养

④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花子房，并进入受精卵A.①② B.②③ C.③④ D.④①

5. 为了防止转基因作物的目的基因通过花粉转移到自然界中的其他植物，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中。其原因是：（ ）

A．叶绿体基因组不会进入到生殖细胞中

B．受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞

C．转基因植物与其他植物间不能通过花粉发生基因交流

D．植物杂交的后代不会出现一定的性状分离比

6. DNA探针能检测到标本上的：（ ）

A．遗传密码 B．遗传信息 C．蛋白质序列 D．细胞结构

7下列关于基因工程应用的叙述，正确的是 ( )

A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交

C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒 D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良

8. 科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗生素抗性基因，该抗性基因的主要作用是

A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B．有利于检测目的基因否导入受体细胞

C．增加质粒分子的相对分子质量 D．便于与外源基因连接

9.科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性。该生物技术为

A．基因工程 B．蛋白质工程 C．基因突变 D．细胞工程

10. 21世纪被认为是生物的世纪，目前基因芯片可以在很短时间内观察病变的细胞，并分析出数种由于基因突变而引起的疾病。下列与基因芯片有关的叙述中，不正确的是（ ）

A．利用基因芯片可以进行基因鉴定 B．基因芯片可以检测变异基因

C．基因芯片可以改造变异基因 D．基因芯片技术能识别碱基序列

11. 目的基因与运载体结合所需的条件是：（ ）

①同一种限制酶 ②具有标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸 ⑦ATP

A．①②③④⑤⑥⑦ B．①②④⑤⑥⑦ C．①②③④⑤⑦ D. ①②④⑤⑦

12. 下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是：（ ）

供体

剪刀

针线

运载体

受体



A

质粒

限制性内切酶

DNA连接酶

提供目的

基因的生物

大肠杆菌等



B

提供目的基

因的生物

DNA连接酶

限制性内切酶

质粒

大肠杆菌等



C

提供目的

基因的生物

限制性内切酶

DNA连接酶

质粒

大肠杆菌等



D

大肠杆菌等

DNA连接酶

限制性内切酶

提供目的

基因的生物

质粒



13. 下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：

A．①②　　　　 B．①③　　　　 C．①④　　　　 D．②③

14. 单子叶植物中常用的一种基因转化方法是（ ）

A．农杆菌转化法 　B．基因枪法 C．花粉管通道法 D．显微注射法

15.通过体细胞杂交，获得一个杂种植株，需要的步骤是

A．制备原生质体→原生质体融合→组织培养→杂种植株

B．制备原生质体→诱导原生质体融合→选择杂种细胞→组织培养→杂种植株

C．获取细胞→原生质体融合→组织培养→杂种植株

D．获取细胞→细胞融合→组织培养→杂种植株

16.下列实例中能体现细胞全能性的是

①用悬浮液培养的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株 ②植物用种子进行繁殖 ③烟草花药离体培养得到了单倍体植株

A．①② B．①③ C．②③ D．①②③

17.细胞工程是一门综合性科学技术，下列哪项技术不属于细胞工程

A.动植物细胞之间的融合 B.抗旱基因转移到植物体内，培养成新植株

C.植物细胞的组织培养 D.细胞核移植培育出的生物具备新的特征

18.在离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织的过程中，下列哪些条件是必需的

①无菌空气 ②充足的光照 ③适宜的温度

④适宜的养料和激素 ⑤消毒灭菌 ⑥适宜的水分

A. ①③④⑤⑥ B. ②③④⑤⑥ C. ①②③④⑤⑥④ D. ③④⑤⑥

19. 将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是

A．具有完整细胞核的细胞 B．一定的营养物质和植物激素

C．离体状态 D．导入标记基因

20.用于动物细胞培养的组织细胞大都取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞

A．容易产生各种变异 B．具有易分化能力

C．取材十分方便容易 D．分化程度低、分裂能力强

21.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件

①无毒的环境 ②无菌的环境 ③合成培养基需加血浆

④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2 ⑥CO2能调节培养液的pH

A．①②③④⑤⑥ B．①②③④ C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥

22.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是

A.细胞核移植和细胞融合技术中，都改变了细胞中的染色体数

B.通过组织培养可以迅速获得大量脱毒植物幼苗

C.经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状

D.克隆动物的性状与供细胞核的个体性状完全相同

23.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是

A.诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段完全相同

C.都能形成杂种细胞 D.所采用的原理完全相同

24. 下列关于基因治疗的说法正确的是 ( )

A．基因治疗能治疗所有的遗传病

B．基因治疗的主要原理是引入健康基因修复患者的基因缺陷

C．基因治疗的主要方法是让患者口服一些健康的外源基因

D．基因治疗在发达国家已成为一种常用的临床治疗手段

25. 下面对动物细胞融合技术及意义叙述不合理的是 （ ）

A．将来有可能通过此方法来生产白细胞介素

B．通过克服远源杂交不亲和现象来获得新物种

C．有助于对细胞这一生命单位的更为科学的认识

D．融合本身与生物膜的流动性直接相关

26．下列关于基因工程的叙述不正确的是 （ ）

A．基因工程往往以细菌抗药性基因为目的基因

B．重组质粒的形成是在细胞外完成的，扩增可以在细胞内完成的

C．人工合成目的基因可以相关的mRNA为模板

D．培育抗除草剂作物新品种，该植物的受精卵可以作为导入抗除草剂基因的受体细胞

27.动、植物细胞培养技术列表比较如下，你认为哪一项目的比较有错误 ( )

比较项目

原 理

培养基区别

结 果

培养目的



植物组织培养

细胞的全能性

需加植物激素

培育成植株

快速繁殖，培育无病毒植株等



动物细胞培养

细胞的全能性

需加动物血清

培育成相应的细胞

获得细胞或细胞 的产物等



 A．原理 B．培养基区别 C．结果 D．培养目的

28.下列实践活动包含基因工程技术的是（ ）

A.水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种

B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦

C.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株

D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆

29.如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7 kb,1kb＝1000对碱基)上相应的E－F区域(0.2 kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2会(　　 )

A．既能被E也能被F切开 B．能被E但不能被F切开

C．既不能被E也不能被F切开 D．能被F但不能被E切开

30．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。下图表示四种质粒和目的基因，其中箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因运载体的质粒是 (　 　)

31.下图是基因工程中利用pBR322质粒 (Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)与抗病基因构建重组质粒的示意图，该质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制性核酸内切酶的识别序列及切割位点见下表。结合图表分析，下列叙述错误的是( )

A．pBR322质粒、抗病基因和重组质粒的基本组成单位都是脱氧核苷酸

B．形成重组质粒时，应选用限制性核酸内切酶PstⅠ和EcoRⅠ对含抗病基因的DNA、质粒进行切割

C．一个质粒被限制性核酸内切酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段和6个黏性末端

D．将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的受体细胞

32．下列有关植物体细胞杂交技术的叙述，错误的是(　 　)

A．需要在无菌环境条件下且培养基中需要加入植物激素

B．需要纤维素酶和果胶酶处理以获得原生质体

C．植物体细胞杂交技术的原理是基因重组

D．利用植物体细胞杂交可以获得多倍体植株

33.某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是（ ）

A. 利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗

B. 采用花粉粒组织培养获得单倍体苗

C. 采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上

D. 采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养

34．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是(　 　)

A．将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体

B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体

D．将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

35．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )

A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞

B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变

C.恶性细胞系的细胞可进行传代培养

D.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的

36．下列说法不正确的是（ ）

A．体细胞融合技术可用于制备单克隆抗体

B. B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因

C. 利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种

D．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，都须用液体培养基

37．下图为转基因抗病香蕉的培育过程示意图。其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ等为相应限制性内切酶的切点，同时质粒中含有卡那霉素的抗性基因(Kanr)。以下有关培育过程的说法正确的是(　　 )

A. ①过程为脱分化，细胞数目不变

B．①②过程需要激素支持以及二氧化碳培养箱

C．在含抗病基因的DNA和质粒中，均只含有1个PstⅠ限制酶的识别序列

D．用含卡那霉素的培养基培养香蕉组织块时，导入普通质粒的组织细胞也能存活

38．下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是(　 　)

①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞　②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞　③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养　④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞　⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞　⑥从小鼠腹水中提取抗体　⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合

A．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥

B．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆

C．⑦过程获得的细胞均可无限增殖

D．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选

39．某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养，下列叙述正确 的是 (　 　)

A．制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理

B．肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸

C．为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的干扰素

D．用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增殖周期长

40．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是( )

A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞

B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株

C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子

D.外植体一般用幼嫩的组织细胞，因为幼嫩的组织细胞脱分化较容易

第Ⅱ卷（非选择题，共40分）

41.(Ⅰ).chlL基因是蓝藻(蓝细菌)DNA上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答：

甲

（10分）

(1)构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是____________和_____________________。

(2)若含有chlL基因的DNA片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如下图所示。请回答：

乙

①构建含chlL基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是____________，对_______________ 进行切割。

②同时用酶1和酶4切割图乙中的质粒，则产生含有1 800对碱基和8 200对碱基的两种片段；用图中四种酶同时切割此质粒，则产生含有600对碱基和8 200对碱基的两种片段；若换用酶1和酶3同时切割此质粒，则产生的片段是______________________。

(Ⅱ).科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下 图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答问题：(7分)

（1）图中质粒上有抗氨苄青霉素和抗四环素两个标记基因，经过①和②步骤后，有些质粒上的 __________基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒，由于目的基因的分隔使得该抗性基因失活。

（2）步骤③是 的过程，为了促进该过程，应该用 _____________处理大肠杆菌。

（3）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 ，能在C中生长的大肠杆菌有 种。

（4）步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示，含目的基因的菌落位于 （D、E）上。请在图中相应的位置上圈出含目的基因的菌落。

42.细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答：（8分）

②过程采用最多的是农杆菌转化法，原因是农杆菌中Ti质粒上的 可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上；检测目的基因是否导人受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用 作探针。

图中③④过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加 ___________________等物质，作用是 。

（3）若要获取转基因植物人工种子，需培养到 阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到 阶段即可。

（4）若采用植物体细胞杂交技术获得新的植物体，细胞间杂交一般采用 作为诱导剂诱导细胞融合，与传统的有性杂交相比，其优势是 。

43.(5分)动物的淋巴细胞虽然能够合成特异性抗体，但可惜它不能在体内繁殖，所以始终只是一份“自身之物”，没有多大作为。另一方面，癌细胞(如骨髓瘤细胞)却刚好相反，它本身虽然不能产生抗体，也没有什么用处，可是却能在体外长期生长，无限增殖。1975年，英国剑桥大学分子生物学实验室的柯勒和米尔斯坦别出心裁，把小鼠的淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合起来，成为一株杂交瘤细胞。这个杂交瘤细胞由于融合了两家之长，因此不但能稳定地分泌抗体(这是淋巴细胞的特点)，而且也能在体外稳定的繁殖(这是肿瘤细胞的专长)，于是第一次实现了在体外大量生产抗体的愿望。如下图所示。

回答以下问题：

（1）你认为两位科学家欲获得产生抗体的淋巴细胞，对老鼠A的必须处理措施是：

。

（2）杂交瘤细胞特点__________________________,繁殖进行的是________________分裂。

（3）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞)与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生命导弹”，这是利用了______________________

（5）单克隆抗体具有特异性强、纯度高、 、容易标准化生产等优点。

44.阅读下列材料回答问题：（10分）

材料一：美国科学家2001年11月25日宣布，他们首次成功克隆了人类胚胎。但是这些科学家同时声称，他们这样做的目的不是为了克隆人，而是为了制造胚胎干细胞治疗多种疾病。克隆就是将一个体细胞的细胞核移入一个已经被去掉细胞核的卵细胞中，然后用电激或者化学方法刺激这个改造后的卵细胞，使它开始分裂并成为一个胚胎，这个胚胎的基因与体细胞提供者的基因绝大部分是相同的。

材料二：2001年11月3日18时05分，我国首例“胎儿上皮细胞”克隆牛“康康”在山东莱阳农学院诞生。现场的公证人员公证，这是我国唯一存活的体细胞克隆牛。上皮细胞是高度分化的体细胞，分化程度越高克隆越难，把它作为供核细胞尚属首例。

材料三： 植物的器官、组织或细胞 培养基中培养 B

胚状体 植物体

杂种细胞

……

(1)“改造后的卵细胞”的分裂是 分裂。

(2)“胚胎的基因与体细胞提供者的基因绝大部分是相同的”。那么“不相同的基因”控制的性状遗传物质主要来自 。

(3)写出材料三、四以下过程或结构的名称：

A 、B、 C、D 。

CD融合成杂种细胞的过程叫做 　　　　　　 ，这一过程的完成，一般常用的化学试剂是 ，同时证明了细胞膜具有 　　 。

(4)请举出与材料二有关的生物技术(至少两种) 。

(5)利用材料三的方法进行名贵花卉离体培养时不应采用该植株的 ( )

A．茎尖 B．子房壁 C．花粉粒 D．叶



41.Ⅰ（1）___________________ ___________________

(2)①_____________,________________________

②______________

Ⅱ.（1）__________________

(2) _________________,_________________

(3)___________________,_____________________

(4)______________

42.（1）_____________,_____________________

（2）_______________,___________________

（3）_______________,_____________________

（4）______________,_________________.

43. （1）__________________________

（2）________________,___________

（3）_____________________________

（4）______________________________

44. （1）_______________

（2）________________

（3）____________,________________,______________

_________________,______________,________________

（4）______________________

（5）_____________