时间：100分钟 分数：100分

命题人：郭绍玲 审题人:郭绍玲

一、选择题（每题2分，共60分）

1．下列有关基因工程和酶的相关叙述，正确的是

A．同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具备专一性

B．运载体的化学本质与载体蛋白相同

C．限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸

D．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键

2. 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是





A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化

C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型 D．丁过程得到的细胞遗传物质发生了改变

3. 下列有关培育转基因动物的相关叙述，正确的是

A．整个培育过程的设计和施工都是在细胞水平上进行的

B．培育转基因动物所需的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的

C．转基因动物的培育成功，表明科学家可打破物种界限，定向改造生物性状

D．转基因动物与原动物相比，由于发生了基因突变而使其基因型发生了改变

4．基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoR I和Sau3A I。下列分析错误的是

A．构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体

B．构建重组DNA时，可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体

C．图乙中的P1噬菌体载体只用EcoR I切割后，含有2个游离的磷酸基团

D．用EcoR I切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA

5．下列关于动物的克隆的叙述，错误的是

A．动物细胞培养获得的有限细胞株大多数具有异倍体核型

B．细胞克隆可以从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系

C．提高动物细胞克隆形成率需要以滋养细胞支持生长及激素刺激等条件

D．核移植形成的重组细胞发育成动物个体体现了动物细胞核的全能性

6．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是

A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B

B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B

C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

7．下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是

A．绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性

B．卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大

C．囊胚的滋养层细胞具有发育全能性

D．原肠胚发育分化形成内外两个胚层

8．PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其基本原理和过程与细胞内DNA的复制类似。下列关于两者共同点的叙述，不正确的是

①边解旋边复制②遵循碱基互补配对原则③需要引物④过程可分为变性、复性、延伸等步骤

A．①② B．②③ C．③④ D．①④

9. 关于蛋白质工程的说法，错误的是

A. 蛋白质工程中要进行基因修饰或基因合成

B. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变其分子结构

C. 蛋白质工程能产生自然界中不存在的新型蛋白质分子

D.蛋白质工程与基因工程密不可分，又称为第二代基因工程

10．下列实践活动包含基因工程技术的是

A．水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种

B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦

C．将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株

D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆

11．从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是

A．合成编码目的肽的DNA片段 B．构建含目的肽DNA片段的表达载体

C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽

13.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是

A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同

B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶

C．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖

D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒

14．将鱼的体细胞核植入去核的卵细胞中，所得重组细胞可培育为克隆鱼。下图中能正确表示动物克隆技术原理的是

15．下列事实属于细胞克隆的是

A．棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B．单细胞的DNA在体外大量扩增

C．培养动物杂交瘤细胞 D．小鼠体细胞经诱导培育成小鼠

16．下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是

A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体

B．使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型

C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性

D．用胰蛋白酶处理动物组织后，可用无菌水稀释制成细胞悬浮液

17．植物体细胞杂交是细胞工程的一种技术，其过程不涉及

A．使用限制性内切酶 B．使用纤维素酶和果胶酶

C．诱导两种不同的细胞融合 D．杂种细胞分裂和分化的选择培养基

18. 下列事实能体现细胞全能性的是

A．棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B．单细胞的DNA在体外大量扩增

C．动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D．小鼠体细胞经诱导培育成心脏

19．下列有关动物胚胎移植的叙述中，正确的是

A．受体母畜必须选择遗传性状优良的品种

B．试管婴儿只是受精过程在试管中进行

C．超数排卵技术要使用一定的促排卵剂

D．受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能成功移植

20．下列对“试管婴儿"和克隆动物培育过程的叙述中，正确的是

①“试管婴儿”的产生是有性生殖②克隆动物的产生是无性生殖③“试管婴儿”是辅助生殖的技术④可以用雄性动物的体细胞核进行克隆

A．①②③ B．①②④ C．③④ D．①②③④

21．下列有关植物组织培养的叙述错误的是

A．植物组织培养过程中要注意细胞分裂素和生长素的适宜比例

B．如果用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物细胞原生质体失去了全能性

C．同种植物的不同基因型个体的细胞全能性表达程度会大不相同

D．植物愈伤组织经液体悬浮培养可以得到具有胚性细胞特征的单细胞

22.右图表示一定条件下将胡萝卜的离体组织培育形成试管苗的过程。有关叙述不正确的是

A．需在无菌条件下将离体组织接种到培养基中

B．图中①②过程分别表示脱分化和再分化

C．利用此过程获得的试管苗均为纯合子

D．此实验说明分化的植物细胞仍具有全部的遗传信息

23. 哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图(N表示染色体组)。

据图分析，下列叙述错误的是

A．次级卵母细胞形成的过程需要激素调节

B．细胞Ⅲ只有在精子的作用下才能形成成熟卵子

C．Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ细胞分裂后期染色体数目相同

D．培育转基因动物应选择细胞Ⅳ作为受体细胞

26.下列关于细胞的叙述，错误的是

A.自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应

B.胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化

C.组织的细胞更新包括细胞凋亡和干细胞增殖分化等过程

D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病

27．通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是

A．对供体和受体母牛都要进行相同激素处理

B．受精和胚胎的培养都需要在体外进行

C．对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植

D．胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低

28.软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是

A．首先经超排卵处理后进行体外受精

B．从囊胚中分离细胞，培养后检测基因型

C．根据检测结果筛选基因型为hh的胚胎

D．将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫

29. 小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。下列相关叙述正确的是

A．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列

B．用PCR方法扩增目的基因时一定要知道基因的全部序列

C．PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶

D．一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞

30.某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是

A．利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B．采用花粉粒组织培养获得单倍体苗

C．采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D．采用幼叶茎尖等部位的组织进行组织培养

一、选择题答题卡（每题2分，共60分）

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二、非选择题（每空1分，共40分）

31．下图是基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题：

（1）从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因,需要用到的工具是_______，此工具主要是从______生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸

序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧梭苷酸之间的______键断开。

(2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有______它 能把目的基因整合到受体细胞______。

（3）E过程是利用______技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做______实验。

（4）将目的基因导入植物细胞，除采用上图中的方法外，还可采用_____法和花粉管通道法。

32.肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答：

(1)进行过程①时，需用限制性内切酶切开载体以插入let-7基因。基因工程中常用的载体是 ，载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 。

(2)进行过程e委时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

(3)研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取. 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 (RASmRNA／RAS蛋白质)含最减少引起的。

33.甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：

(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用________酶和________酶去除细胞壁，获得具有活力的________，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成________组织，然后经过__________形成完整的杂种植株。这种培育技术称为________________。

(2)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的__________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

34.科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS 细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：

(1)从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为________，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为________。

(2) 图中2－细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为________；也可从灰鼠体内取出卵子，通过________后进行早期胚胎培养获得。

(3) 为了获得更多的黑鼠，通常将胚胎干细胞培养到桑椹胚或________期后，采用__________获得更多的胚胎，然后再采用__________等技术将胚胎移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用________方法保存。

(4) 将胚胎干细胞置于母鼠子宫内发育成个体，体现了胚胎干细胞具有________。小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的__________分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向__________后用于疾病的细胞治疗。

（5）若要培养转基因小鼠，为了使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的细胞核转入____________________中构成重组细胞，该技术称为________。

(6)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡最可能原因：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

35.黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图

（1）据图回答问题：

①过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是

②检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用 方法。

（2）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表：

据表回答问题：

① 本实验的两个自变量，分别为 。

② 本实验中．反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是 。

③ 经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加 克AFB1解毒酶．解毒效果最好．同时节的了成本。

（3）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的 。