考试时间：90分钟 满分：100分

一、单项选择题（25×2=50分）

1.基因工程技术引起的生物变异属于（　　）

A．染色体变异 　B．基因突变 C．基因重组 D． 不可遗传的变异

2.在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（　　）

A．540个 　　B．8100个 　　C．17280个 　 D．7560个

3.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④提取目的基因。正确的操作顺序是（　　）

A．③②④① 　　 B．②④①③ C．④①②③ 　 D．③④①②

4.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是（　　）

A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体

B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失

C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染

D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的

5.当前医学上，蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂，则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是（　　）

A．都与天然产物完全相同 B．都与天然产物不相同

C．基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同

D．基因工程药物与天然产物不相同，蛋白质工程药物与天然产物完全相同

6．下列不属于动物细胞工程应用的是 ( )

A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染

B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞

C．大规模生产食品添加剂、杀虫剂等　　　　

D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖

7．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 ( )

A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞

B．用胰蛋白酶处理培养过程中的杂交骨髓瘤细胞

C．用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体

8．在进行植物组织培养时，培养基中的某种化合物被 3H标记。一段时间后，发现 3H只集中在愈伤组织细胞的细胞核、线粒体和叶绿体。则培养基中被标记的化合物最可能是 ( )

A.氨基酸 B．核苷酸 C．葡萄糖 D．水

9．下图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物紫草素，应分别选用编号是的 （ ）

A．④② B．③② C．③④ D．④③

10．下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）

A. 叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞

B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织

C. 融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜

D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性

11．下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是 （ ）

A．利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术

B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组

C．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体

D．“试管婴儿”实质上就是“体外受精”和“胚胎移植”的“产物”，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术

用纯种的高杆(D)抗锈(T)小麦与矮杆(d)易染锈病(t)小麦培育矮杆抗锈病小麦新品种的方法如下：

高杆抗锈病×矮杆易锈病
Fl
雄配子
幼苗
选出符合要求的品种下列有关此种育种方法的叙述中，正确的是 ( )

A．这种育种方法叫杂交育种 B．过程④必须使用生长素处理

C．这种方法的最大优点是缩短育种年限 D．③过程必须经过受精作用

13.精子的变形过程中（ ）演变为精子的尾

A.高尔基体 B.细胞核 C.内质网 D.中心体

14.当卵细胞达到（ ）时期时，才具备与精子受精的能力

A.减数第二次分裂后期 B.减数第一次分裂末期

C.减数第二次分裂中期 D. 减数第二次分裂结束成熟

15.供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是（ ）

A、防止受体牛不愿意接受胚胎

B、只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育

C、只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同

D、同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强

16.英国科学家维尔穆特首次用羊的体细胞（乳腺细胞）成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是（　 ）

A将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔的子宫内，并最终发育成两只一样的兔子

B将人抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的烟草新品种

C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞

D将人的精子与卵细胞在体外受精，待受精卵在试管内发育到囊胚期时，再植入女性子宫内发育成“试管婴儿”

17.下列属于精子、卵子发生上的区别的是( )

A．细胞的分裂方式 B．卵子在卵巢内的储备

C．成熟细胞的染色体数量 D．细胞遗传物质的变化

18．受精过程的顺序为( )

①第一次卵裂开始 ②释放第二极体 ③顶体反应 ④穿越透明带

⑤雌、雄原核的形成 ⑥核膜消失，雌、雄原核融合

A．①②③④⑤⑥ B．③②④⑤⑥① C．④⑤②①③⑥ D．③④②⑤⑥①

19．中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植人去核后的兔子卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关克隆大熊猫胚胎的叙述中，错误的是( )

A．在形成早期胚胎的过程中，依次经历了卵裂、囊胚、原肠胚等几个阶段

B．兔子卵细胞质的作用是激发大熊猫细胞核的全能性

C．克隆出的早期胚胎中，各细胞间具有相同的遗传信息

D．在形成早期胚胎的过程中，尚未出现细胞的分化

20．胚胎干细胞功能特性不包括 ( )

A．具有发育的全能性 B．体外培养可以分化成各种组织、器官

C．冷冻保存可以进行遗传改造 D．可以进行增殖

21．一般情况下，下列的细胞中分化程度由高到低的顺序依次是( )

①卵细胞 ②受精卵 ③胚胎干细胞 ④造血干细胞 ⑤神经细胞

A．⑤①②③④ B．⑤③①②④ C．⑤①④②③ D．⑤①④③②

22．“试管婴儿”技术是解决不孕症的有效手段，1978年世界上诞生了第一例“试管婴儿”。这项技术实际上是指受精卵在体外培养3~5天，形成胚胎后移植回母体子宫，着床着继续发育形成胎儿直至分娩，请判断“试管婴儿”技术在生物学上依据的原理是（ ）

A．有性生殖 B．无性生殖 C．克隆技术 D．基因工程

23．下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是 (　　 )

A．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接

B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录

C．一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因

D．胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞

24．下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是 ( )

A．受孕母畜体内的早期胚胎能够移植

B．受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态

C．超数排卵技术要使用一定的激素

D．试管婴儿的受精及胚胎发育过程在试管内完成

25．驱蚊草(又名蚊净香草)含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是

A．驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍

B．驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法

C．驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无愈伤组织和试管苗形成

D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离

二、非选择题（共50分，除特别标注的分数外，其它每空1分）

1．（8分）2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 ，理由是： 。（2分）

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是 。

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免 。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用以下数字表示，2分）。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

2、(8分)目前所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图所示。

(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于 。

(2)pBR322分子中有单个EcoR I限制酶作用位点，EcoR 1只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。(2分)

(3)pBR322分子中另有单个的BamHI限制酶作用位点，现将经BamHI处理后的质粒与用另一种限制酶BgIⅡ处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复______ 键，成功的获得了重组质粒。

(4)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。图二中的菌落抗性为________（2分），图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是____。（2分）

3、（8分）香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。

请根据上述材料，回答下列问题：

（1)简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。（2分）

（2）脱毒香蕉苗的获得，可采用 （2分）的方法，此方法的依据是 （2分）和 。（2分）

4、（8分）2n/4n 嵌合体胚胎是指用四倍体 (4n )胚胎与二倍体胚胎(2n )或胚胎干细胞 (ES 细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n 嵌合体胚胎的构建常用方法如下图，请据图分析回答：

（1）受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞达到 时期，才具备受精的能力，而精子需经过 过程才能和卵细胞结合。

（2）2N的ES细胞来自胚胎发育过程的 期，本实验中从功能上说明了该细胞

（3）2n/4n 嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有： （2分）

（4）ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是什么？ （2分）

5、（11分）右图表示海星胚胎发育过程中的两个阶段。请据图回答下列问题：

(1)甲图为海星胚胎发育过程中的 期，乙图为海星胚胎发育过程中

的 期。

(2)随着胚胎发育的进行，甲图中1处的细胞最可能成为乙图中[ ] （2分）胚层的一部分，甲图中2处的细胞最可能成为乙图中

[ ] （2分）胚层的一部分。

(3)如果乙图中三个胚层继续发育，除了要进行相应的细胞分裂以外，还必须经过 ，形成组织、器官，最后才能发育成一个完整的幼体。

(4)假设海星的体细胞的染色体数为2N，则乙图中4处细胞的染色体数为 。（2分）

(5)在发育过程中，乙图所示胚胎的早期细胞从一个部位移到另一部位时，被移植的细胞能参与该部位将来的器官形成。但如果在晚期，将未来发育成后肢的部分移植到胚体的另一部位，发现此细胞仍发育成后肢，使动物畸形，这说明 （2分）

A.乙图所示胚胎的细胞具有全能性 B.乙图所示胚胎的晚期出现了组织器官

C.乙图所示胚胎已形成了三个胚层 D.乙图所示胚胎的晚期细胞出现了分化

6、（8分）回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。

(2)传代培养的细胞一般传至 后就不易传下去了。继续培养时，绝大部分细胞分裂停止，少部分细胞会克服细胞寿命的极限，获得 。

（3)在细胞培养过程中，通常在 条件下保存的细胞往往10代以内，是为了保持细胞正常的 。