一、选择题（每题2分，共50分）

1、将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是（ ）

A．Ca﹢处理法 B．显微注射法

C．基因枪法 D．农杆菌转化法

2、既可用于基因重组技术又可用于细胞融合技术的是（ ）

A．病毒 B．纤维素酶

C．聚乙二醇 D．质粒

3、下列实践与基因工程无关的是（ ）

A．选择“工程菌”来生产胰岛素

B．培育转基因抗虫棉

C．人工诱导多倍体

D．利用DNA探针检测饮用水是否含有病毒

4、用某种生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的( )

A.cDNA文库 B.基因组文库

C.cDNA文库或基因组文库 D.部分基因文库和基因组文库

5、基因工程与蛋白质工程的区别是（ ）

A．基因工程对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作

B．基因工程合成的是天然的蛋白质，蛋白质工程合成的不一定是天然存在的蛋白质

C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或形状水平）操作

D．蛋白质工程完全不同于基因工程

6、在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是（ ）

①一个表达载体的组成必须有目的基因、启动子、终止子3个部分

②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA

③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止

④所有基因表达载体的构建是完全相同的

A．②③ B．①④

C．①② D．③④

7、下列除哪项外，均是农杆菌的特点（ ）

A．农杆菌的Ti质粒上有T-DNA

B．自然条件下只能感染双子叶植物和裸子植物

C．能受到植物伤口处的细胞分泌的大量酚类化合物吸引，移向这些细胞

D．T-DNA可转移至受体细胞，并插入到植物细胞染色体的DNA上

8、用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里有关的基因探针是指（ ）

A．人工合成的免疫球蛋白的DNA分子

B．基因探针能检测到标本上的蛋白质序列

C．用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子

D．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子

9、聚合酶链式反应是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由变性、退火及延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是（ ）

A．PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术

B．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板

C．PCR技术中酶和引物只须加入一次，可以重复利用

D．应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变

10、年仅4岁的美国女孩阿尚蒂由于腺苷酸脱氨酶基因缺陷导致T淋巴细胞不断中毒死亡，患有严重的复合型免疫功能缺陷病。1990年9月14日她接受了人类历史上首例基因治疗，在治疗过程中，可作为受体细胞的是( )

①受精卵 ②效应T细胞 ③T细胞 ④造血干细胞

A、①② B、③④

C、②③ D、①③

11、某种花卉感染了植物病毒，叶子出现疱状，欲培育出无病毒的后代，应采取的方法是（ ）

A.用种子培养后代 B.用无明显症状部分的枝条扦插

C.用茎尖进行组织培养诱导出植株 D.用叶表皮细胞进行组织培养诱导出植株

12、下列哪项不是人工种子的优点（ ）

A.克服季节、气候、地域的限制 B.节约时间、土地

C.防止性状分离 D.得到纯合子

13、采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（ ）

A．如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法获得该目的基因

B．人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达不再遵循中心法则

C．在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中

D．人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA

14、目前科学家把兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞中，在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白，下列哪一项不是这一先进技术的理论依据（ ）

A．所有生物共用一套遗传密码

B．基因能控制蛋白质的合成

C．兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成，都遵循相同的

碱基互补配对原则

D．兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先

15、人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程

① ② ③

是：甲生物的蛋白质→mRNA――→目的基因――→与质粒DNA重组――→导入乙细胞

④

――→获得甲生物的蛋白质，下列说法正确的是(　　)

A．①过程需要的酶是逆转录酶，原料是A、U、G、C

B．②要用限制性核酸内切酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起

C．如果受体细胞是动物细胞，③过程可用农杆菌转化法

D．④过程中用的原料不含有A、U、G、C

16、下列过程中，没有发生膜融合的是（ ）

A.植物体细胞杂交 B.受精过程

C.氧进入细胞中的线粒体 D.浆细胞产生抗体

17、下面为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是（ ）

A．上述过程中脱分化发生在b步骤，在此过程中植物激素发挥了重要作用

B．再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程

C．从叶组织块到种苗形成的过程说明植物叶片细胞具有全能性

D．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题

18、下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）

A．①②③④ B．①②④③

C．①④②③ D．①④③②

19、生物工程的兴起标志着人们从认识生命活动的奥秘到按照人们的愿望改造生物的巨大飞跃。下列选项中能正确说明生物工程技术应用的是（ ）

A.植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体

B.基因治疗目前正处在初期的临床试验阶段

C.人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造

D.植物体细胞杂交技术已经可以按照人们的意愿表现出双亲优良性状

20、科学家将一段控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋。以下描述不正确的是（ ）

A．这些鸡是转基因工程的产物 B．这种变异属于可遗传的变异

C．该过程运用了胚胎移植技术 D．该技术可定向改造生物

21、碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中（ ）

①种子的萌发 ②病毒的增殖过程 ③细菌的二分裂过程

④目的基因与运载体的结合 ⑤DNA探针的使用 ⑥分泌蛋白的加工和运输

A．①②③④⑤　 　B．①②③④⑤⑥

C．②④⑤ D．②③⑤⑥

22、如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是（ ）

A．利用含有四环素的培养基可将含分子Ⅱ的细菌筛选出来

B．Ⅲ是农杆菌，通过步骤③将目的基因导入植株

C．⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质

D．①过程的完成在体外进行

23、降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：

获得的双链DNA经EcoRI(识别序列和切割位点
)和BamHI(识别序列和切割位点
)双酶切后插入大肠杆菌质粒中。下列有关分析错误的是

A．Klenow酶是一种DNA聚合酶

B．合成的双链DNA有144个碱基对

C．EcoRI和BamHI双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

24、现有一长度为3000碱基对（bp）的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图1。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是（ ）

25、RuBP羧化酶是植物体内催化CO2固定的酶。将豌豆根、茎、叶的一部分置于光下12 h，另一部分置于黑暗中12h。然后从这些材料中分别提取mRNA，进行分子杂交。用于杂交的探针是四种不同基因片段（已标记）。结果如下（“+”表示杂交带）：

探针

叶

茎

根

卷须





光

暗

光

暗

光

暗

光

暗



1

++++

+

—

—

—

—

++

+++



2

+++

+++

++

+

+

—

+++

+++



3

+++

+

+++

+

+

+

++

+++



4

++++

+

+

—

—

—

+++

+



如果用RuBP羧化酶的基因作为探针，得到的结果是

A．1??? ??? B．2??? ???

C．3 ?? ?? D．4

二、非选择题（每空2分，共50分）

1、（16分）下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。

资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达【5’AOX1和3’AOX1（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子】。

资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上 、 限制酶识别序列， 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。

（2）酶切获取HBsAg基因后，需用 将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取 。

（3）步骤3中应选用限制酶 来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用 方法进行检测。

（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入 以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。

（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行 并分泌到细胞外，便于提取。

2、（20分）将发芽率相同的甲、乙两种植物的种子，分别种在含有不同浓度(质量分数)钠盐的全营养液中，并用珍珠砂通气、吸水和固定种子。种子萌发一段时间后，测定幼苗平均重量，结果如下图。

请据图回答问题：

(1)甲、乙两种植物相比，更适宜在盐碱地种植的是????? ?? 。

(2)导致甲种植物的种子不能萌发的最低钠盐浓度为????? ?? %。

(3)在钠盐浓度为0.2%的全营养液中，甲、乙两种植物的根尖细胞吸收矿质元素的方式均为???????? ???????。

(4)将钠盐浓度为0.1%的全营养液中的甲种植物的幼苗，移栽到钠盐浓度为0.8%的全营养液中，其根尖成熟区的表皮细胞逐渐表现出质壁分离的现象，原因是?????????????? 。

(5)取若干生长状况相同并能够进行光合作用的乙种植物的幼苗，平均分成A、B两组。A组移栽到钠盐浓度为0.8%的全营养液中，B组移栽到钠盐浓度为1.0%的全营养液中，在相同条件下，给与适宜的光照。培养一段时间后，A组幼苗的长势将????? ?? B组。从物质转化的角度分析，其原因是?????????????? ???????????????????????????? ??。

(6)通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势，培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：

①A是??? ???? 酶。B是??? ???? 。C是具有???? ??? 性状的幼芽。

②若目的植株丢失1条染色体，不能产生正常配子而高度不育，则可用????? ?? （试剂）处理幼芽，以便获得可育的植株。

3、（14分）图1—4是与细胞内合成和分泌某些蛋白质有关的结构和生理过程示意图，请据图回答：

(1)不同细胞分泌物的分泌方式主要有两种，一种是分泌物形成后随即被排出细胞，这种分泌方式称为连续分泌；另一种是分泌物形成后先在分泌颗粒中贮存一段时间，待相关“信号”刺激影响时再分泌到细胞外，这种分泌方式称为不连续分泌。图1表示不同分泌蛋白合成和分泌的两种途径，若该细胞为甲状腺细胞，那么引起甲状腺激素分泌的直接“信号”是 ，细胞膜上接受信号的物质基础是 (用图4中的字母表示)；若该细胞为下丘脑细胞，则影响其合成与分泌促甲状腺激素释放激素的“信号”是 。

(2) 图2所示过程的场所发生在图1的细胞核中，若该过程发生在高等植物的叶肉细胞中，其场所还有 ；图2中②与③在组成成分上相同的物质有 。

(3) 图2与图3所示过程相比，碱基互补配对方式的不同点是 。

(4) 若图4是某小肠绒毛上皮细胞膜的一部分，则在进食后，甘油和葡萄糖分别是

通过 方式(用图4中字母表示)进入细胞膜。